基础微生物实验板书.ppt

实验一实验一显微镜的构造和使用显微镜的构造和使用方法与细菌的革兰氏染色方法与细菌的革兰氏染色????((11)了解普通光学显微镜的构造)了解普通光学显微镜的构造、学会、学会显微镜使用和维护方法;显微镜使用和维护方法;??((22)掌握细菌涂片技术、革兰染色方法)掌握细菌涂片技术、革兰染色方法及其原理;及其原理;??((33)熟悉细菌基本形态。)熟悉细菌基本形态。????(一)普通光学显微镜的构造(一)普通光学显微镜的构造分光学和分光学和机械两大部分。光学部分包括接目镜、接机械两大部分。光学部分包括接目镜、接物镜、集光器、光源等;机械部分有镜筒、物镜、集光器、光源等;机械部分有镜筒、镜臂、镜座、旋转器、载物台、光圈、倾镜臂、镜座、旋转器、载物台、光圈、倾斜关节、调节螺旋、次台等。斜关节、调节螺旋、次台等。??(二)油镜使用的基本原理(二)油镜使用的基本原理??油镜头的晶片细小,进入镜中的光亮亦较油镜头的晶片细小,进入镜中的光亮亦较少,其视野较用高倍镜时暗。当油镜和标少,其视野较用高倍镜时暗。当油镜和标本间介质为空气时,因空气与玻璃的折射本间介质为空气时,因空气与玻璃的折射率不同,会有一部分光线被折射而不能进率不同,会有一部分光线被折射而不能进入油镜内,使视野更暗,若在镜头与标本入油镜内,使视野更暗,若在镜头与标本之间放上与玻璃的折射率相同的油类,如之间放上与玻璃的折射率相同的油类,如香柏油等,则光线不发生折射,从而增加香柏油等,则光线不发生折射,从而增加视野的照明度。视野的照明度。??(三)显微镜的使用方法(三)显微镜的使用方法????22、低倍镜观察、低倍镜观察??33、高倍镜观察、高倍镜观察??44、油镜观察、油镜观察??55、用低倍镜和高倍镜观察酵母标本片,、用低倍镜和高倍镜观察酵母标本片,油镜观察球菌、杆菌、螺旋菌的染色标本油镜观察球菌、杆菌、螺旋菌的染色标本片。片。??(四)(四)简单染色法与革兰氏染色法简单染色法与革兰氏染色法??((11)观察细菌的基本步骤:先用低倍镜再用高倍)观察细菌的基本步骤:先用低倍镜再用高倍镜镜??((22)革兰氏染色法操作:)革兰氏染色法操作:涂片涂片→→干燥干燥→→固定固定→→草酸铵结晶紫出染(草酸铵结晶紫出染(1min1min))→→水洗水洗→→碘液媒染(碘液媒染(1min1min))→→水洗水洗→→95%95%乙醇乙醇脱色(脱色(30s30s))→→水洗水洗→→沙黄复染(沙黄复染(1min1min))→→水洗水洗→→滤纸吸干滤纸吸干→→油镜检查油镜检查????((11)细菌制片时不宜涂厚。)细菌制片时不宜涂厚。??((22)严格保证脱色和染色时间。)严格保证脱色和染色时间。??((33)使用显微镜注意保护镜头。)使用显微镜注意保护镜头。??思考题思考题??11、绘出你所观察到的细菌形态图。、绘出你所观察到的细菌形态图。??22、观察细菌时为何使用油镜?它与普通物镜在、观察细菌时为何使用油镜?它与普通物镜在使用方法上有何不同?使用方法上有何不同???33、光学显微镜的目镜与物镜的常用放大倍数?、光学显微镜的目镜与物镜的常用放大倍数?显微镜的放大倍数越高,分辨力越高吗?为什么显微镜的放大倍数越高,分辨力越高吗?为什么??举例说明。举例说明。??11、绘出你所做的革兰氏染色制片中细菌的形态、绘出你所做的革兰氏染色制片中细菌的形态图,并标明总放大倍数及染色反应结果。图,并标明总放大倍数及染色反应结果。??22、详叙革兰氏染色的原理及操作方法,染色时、详叙革兰氏染色的原理及操作方法,染色时应注意哪些问题?应注意哪些问题?实验二实验二培养基的制备培养基的制备????((11)掌握一般培养制备原理及原则,并学会配制一般)掌握一般培养制备原理及原则,并学会配制一般普通培养基操作过程;普通培养基操作过程;??((22)学****微生物实验室常用灭菌设备的使用方法;)学****微生物实验室常用灭菌设备的使用方法;??((33)学****玻璃器皿的包扎方法。)学****玻璃器皿的包扎方法。????((11)液体培养基的制备)液体培养基的制备??((22)固体培养基的制备)固体培养基的制备??((33)微生物实验室常用灭菌设备的使用方法和灭菌方)微生物实验室常用灭菌设备的使用方法和灭菌方法法??((44)玻璃器皿的包扎方法)玻璃器皿的包扎方法??((55)棉塞的制作方法)棉塞的制作方法????11配料配料→→温水溶解温水溶解→→校正校正pHpH值值→→煮沸煮沸→→加加琼脂融化琼脂融化→→过滤过滤→→分装分装→→加盖棉塞