氯霉素胶体金试纸条的研制.pdf

摘要1呲4帆m叭mm眦灿44哪{Y1942628摘要***霉素是一种高效广谱抗生素,常用于治疗人体和动物的细菌性疾病,但是***霉素残留对人体有较强的副作用,所以对于动物源性食品中的***霉素残留的检测显得尤为重要。传统***霉素残留分析不乏灵敏度高,准确性好的检测方法,但很难满足现场、快速的检测需求。故建立快速、高效的检测方法并制备出相应的产品是大势所趋。本研究为了提高胶体金试纸条的灵敏度和稳定性,对不同粒径的胶体金试纸条工艺、样品前处理方法进行了优化,具体研究内容如下:(1)胶体金试纸条工艺优化利用***霉素胶体金免疫层析分析方法制备***霉素胶体金试纸条,利用柠檬酸三钠法分别制备20、30、40nm胶体金,并分别优化三种胶体金试纸条的制备工艺条件。结果发现,用同样的方法标记三种胶体金标记***霉素单克隆抗体效果没有明显差异,只是标记蛋白量略有不同;三种金标抗体纯化离心速度分别为10000、8000、8000r/rnill,粒径越小离心速度越大;三种粒径的胶体金可以共用试纸条材料,只是在***纤维膜上抗原、羊抗鼠IgG最佳包被浓度略有不同。(2)试纸条性能测试20、30、40咖胶体金试纸条灵敏度依次为7、3、9n酌nL;与青霉素、庆大霉素、链霉素、四环素的交叉反应均大于200n卧IlL;干燥保存2个月;30姗的胶体金制备的胶体金试纸条在稳定性、灵敏度方面都明显优于20nm和40呦。(3)实际样品检测利用30llIIl胶体金生产***霉素胶体金试纸条,并对实际样品进行检测,成品试纸条检测结果稳定、可靠。与传统样品前处理方法相比,固相萃取技术不但能较好的从样品中提取目标物,且达到富集的目的,从另一个角度提高检测方法的灵敏度。关键词:***霉素,胶体金,粒径,ELISA,前处理,固相萃取nAbSt豫ctAbstractCMo瑚nphemcol(CAP)is觚e毹ctivebroad—∞,∞-site,瑚【,,t0inl—ove廿lesenSitiVit)r锄ds切面ilit)rofC0lloidalgold嘶p,:(1)'sizeofwhiChⅥ傩20nm,∞w{ly'butthereisslightlydi岱:∞gold曲mda丽,antibodyp嘶ficationcentri如gationspeedwere1OOOO,8000,8000r/Ⅱ圮materi幽ustillme窳∞celtuloSemenlbralleaIItigen,she印锄ti—mouseIgGcon