猪血栓烷素B2TXB2酶联免疫分析.doc

猪血栓烷素B2(TXB2)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T3ng/L-120ng/L使用目的:本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中血栓烷素B2(TXB2)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪血栓烷素B2(TXB2)水平。用纯化的猪血栓烷素B2(TXB2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入血栓烷素B2(TXB2),再与HRP标记的血栓烷素B2(TXB2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的血栓烷素B2(TXB2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中猪血栓烷素B2(TXB2)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(240ng/L)×1瓶3酶标包被板12孔××1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。120ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液60ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液30ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液15ng/:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,