仿刺参微卫星DNA标记的筛选与应用及性别差异研究初探.pdf

却迩皊题仿刺参微卫星昙堑纳秆∮胗τ及性别差异研究初探研究方向:姓英文题目专业:名:指导教师:临床兽医学分子生物学臧云鹏王印庚研究员二零一一年五月七日,■鰎‘■■畆,■..瘛#琾■觥鰎◆旁■§”~●
学位论文作者签名:∥跤忝诫逸学位论文作者签名:捌酞;逾日期:一叼月\日日期:⒛闿月上海海洋大学学位论文原创性声明上海海洋大学学位论文版权使用授权书本人郑重声明:我恪守学术道德,崇尚严谨学风。所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写,我对所写的内容负责,并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密,在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密指导教师签名:日期:年上海海洋大学硕士学位论文口◆●
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仿刺参微卫星昙堑纳秆∮胗τ眉靶员鸩钜煅芯砍跆摘要肍姆椒ü菇舜滩的微卫星患目猓觳饨峁证明该微卫星目獾母患饰%。测序得到条含有微卫星的序列的克隆,共得到鑫⑽佬荄位点,其中完美型的微卫星个,⑽佬荄共个,⑽,,⑽佬荄序列,共设计了对引物。结果表明方法可以较好的应用于刺参微卫星坏愕姆掷搿U庑微卫星昙堑幕竦媒4滩稳禾逡糯ǘ嘌苑治觥⒁糯计坠菇ā⒎肿标记辅助育种等研究奠定良好的基础。蒙杓频晕⑽佬荄标记引物对采自中国青岛、韩国木浦、韩国江陵、日本新泻以及俄罗斯海明崴龅乩砣禾宓姆麓滩我约懊拦睾5陌私遣谓行了微卫星嗵陨秆⒁糯ǘ嘌运揭约耙糯ń峁狗治觥=峁砻鳎个位点均表现出多态性,共检测出龅任换颍魑坏惴直鹄┰龅玫~个等位基因,;个仿刺参群体间的遗传相似系数在陨希嗨菩越细撸麓滩稳禾逵氚私参的相似性则较低。聚类分析结果表明,中国群体与韩国西海岸群体聚类成一支,而俄罗斯群体、韩国东海岸群体和日本群体聚类成另外一支,聚类的先后与它们在地理分布上的海域位置有一定的相关性。本研究所筛选的多态性微卫星子标记将为刺参群体遗传结构分析、刺参遗传连锁图谱构建和分子标记辅助育种研究提供基础。此外,不同群体刺参遗传结构的解析结果也为刺参良种选育相关研究提供基础数据。霉ザ镜姆椒ㄑ〕龈胁〈滩魏涂共〈滩胃罚槌筛胁∪禾搴涂共∪禾濉用对微卫星引物对两个群体刺参个体的基因组欣┰觯ǚ郊煅楦鞯位基因在两个群体间出现频数的差异,得到与抗病正相关的特异性遗传标记觯与抗病负相关的特异性遗传标记觥S远嗵砸锒粤礁鋈禾宓囊糯ǘ嘌上海海洋大学硕士学位论文●◆
性水平及遗传结构进行了分析,结果发现,两个群体的遗传多样性水平均较高,抗病群体的遗传多样性水平要高于感病群体。两个群体间的遗传分化指数为得髁礁鋈禾寮浯嬖谇岫鹊囊糯ǚ只涣礁鋈禾寮涞囊糯ň嗬胛.,遗传相似性指数为U庑┛共∠喙氐囊糯ū昙墙4滩畏肿痈ㄖ痔峁数据支持。诖滩紊臣窘诓杉滩危捎米橹а芯糠椒ǎ源滩翁灞谘肺6哉眨观察了雌雄刺参生殖孔及周围的肌肉组织,在雄参和雌参生殖孔及周围肌肉的横切及纵切切片中均发现了生殖管。雌雄刺参的生殖管在直径大小、横切形状及周围组织结构矫婢胁煌P鄄蔚纳彻苤本缎。崆行巫次T残位蛐男危围没有纤维状组织;刺参的生殖管直径大,横切形状为梭形,较大的生殖管周围有纤维状组织。本研究的发现为刺参性别鉴定技术提供了参考,为刺参生殖孔的形成以及性别分化机制等研究奠定了基础。肁际酰τ訟镒楹希源滩未菩刍蜃镈进行检测,筛选与刺参性别相关的分子标记。实验中共扩增出个位点,未发现性别相关的特异性标记,发现了鑫坏阍诖菩院托坌愿鎏逯谐鱿值谋壤嬖诤大差异笥,用这鑫坏慊嬷拼滩胃鎏寰劾嗤迹砻髡个多态位点与刺参性别之间存在很大的相关性。本研究所积累的大量分析结果和数据,可作为刺参遗传背景资料,为刺参性别以及其他方面的进一步研究提供参考。关键词:刺参,,性别,糯ǘ嘌裕共∠喙乇昙◆上海海洋大学硕士学位论文●
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目录摘言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯..第一章文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯