胶质细胞谷氨酸转运体-1a反义寡核苷酸的设计及效果评价.pdf

聊擗表试碱生躲到耐聊签袁决级学院领毒毒;研究生签名:到偷际η┱拢趄嗣獠省婕堆г毫煜哺钦拢研究生签名:各嬲≯月划口年惶築河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺研究生学位论文独创性声明本学位论文研究所获得的研究成果,其知识产权归河北医科大学所与学位论文主要内容相关的论文,第一署名单位为河北医科大学,试本学位论文在导师蛑傅夹∽的指导下,由本人独立完成。有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则,承担相应的法律责任。本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特别加以标注等内容外,文中不包含其他人已发表或撰写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写,文责自负。
—■●
录胶质细胞谷氨酸转运体匆骞押塑账岬纳杓萍靶Ч兰目中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ぁ英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯研究论文前言材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··········⋯·····⋯一··⋯·⋯⋯···⋯··⋯⋯⋯·····⋯⋯⋯·····⋯·讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯······⋯⋯⋯·⋯⋯一·····⋯····⋯···⋯⋯⋯···参考文献综述谷氨酸转运体研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯致谢个人简历···⋯·⋯·······⋯·⋯·············⋯········⋯⋯⋯⋯⋯一·”·一·⋯一一”””“”””⋯””“““””“⋯”“一“⋯⋯⋯““”一””“一一结果·⋯⋯⋯···⋯··⋯···⋯⋯⋯⋯··⋯⋯····⋯····⋯···““一··“·⋯附图结论················⋯·····⋯⋯⋯⋯···⋯·⋯·一·····⋯⋯⋯⋯“一·····⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯······⋯⋯··⋯·····⋯·⋯·····⋯···⋯一··一·⋯⋯⋯⋯一⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯璂刖舌
。细胞内的谷氨酸主要存在于谷氨酸能神经末梢囊泡内,当神经末条件下,由于体内高效能的谷氨酸摄取系统的存在,使细胞外的谷氨酸维,将其要目的:在中枢神经系统中,谷氨酸是主要的兴奋性神经递质之一,也是一种潜在的神经毒素。正常状况下,神经元细胞内外谷氨酸浓度相差万梢去极化而兴奋时,囊泡内的谷氨酸就会通过钙离子依赖方式释放。生理持在较低的水平,仅有少量作为兴奋性神经递质参与信号传递。细胞外谷氨酸低浓度的维持主要依赖于览档墓劝彼嶙T颂又称兴奋性氨基酸转运体,摄入胶质细胞和神经元内。目前已克隆得到植煌腅,分别为、和瓒,其中胶质细胞转运体和直鹩纸凶鞴劝彼崽於彼嶙T颂珿凸劝彼嶙T颂澹直怀莆P朔苄园被嵩靥澹.。谷氨酸转运体的主要功能就是将细胞外的谷氨酸摄取到细胞内,维持细胞外谷氨酸处于低浓度。研究表明,胶质细胞谷氨酸转运体,特别是谇宄赴夤劝彼帷⑽制浯τ诘团ǘ确矫娣⒒又饕W用。根据其羧基端不同,存在三种剪接变异体,分别为虶.。在大鼠的脑组织中表达丰富,在海马占总我室最近研究表明,贑诱导的脑保护机制中发挥重要作用。但是,募艚颖湟焯錑贑诱导的脑保护机制中作用如何,研究贑诱导的脑保护机制中的作用的一个重要策略是阻断其表达和功能。但是目前尚未发现的特异性阻断剂。,使之与特定的靶基因或形成杂交链,从而选择性地封闭靶基因表达。反义寡核苷酸中文摘要摘的%左右。尚未见报道。珿
珹甇是一段碱基长的人工合成单链核苷酸片段,可以选择性和特异性地阻断目的基因的表达。反义寡核苷酸设计的关技术对键是如何在链上选择最佳作用位点。,为研究在盏嫉脑保护机制中作用提供实验依据。.的设计根据羧基末端的特异序列,应用镜腁设计了鮃次简称为、、、、,其序列分别如下:.的效果评价年妊芯勘砻鳎锋咔赡珻梢上调大鼠海马组织及其蛋白的表达。为高效筛选有效的.,,对所设计的抑制蛋白表达的效果进行评价。在此基础,。系鞔笫蠛B鞢区蛋白的表达年妊芯勘砻鳎珻可以上调大鼠海马组织的表达,但并未特别指出其对的上调作用。本实验首先观察訥纳系髯饔谩方法:只雄性大鼠.,随机分为组及。,共危欢鳦组大鼠则以同样方法给予上各组均于末次腹腔注射后〔,利用—,鮃..依//R’.’:瓽’:.’.:瓵..
,内含甇光组表脑组大鼠腹腔注射/咳找淮危次;于第一次注也嗄允易⑸。.,