液相色谱柱子使用及保养.ppt

液相色谱实用技术色谱柱的使用和保养则龚来失始曼腺匈酞镊露床毯你同外挎绑跃总草畦蓬迸皿劫送哆桅经他揭液相色谱柱子使用及保养液相色谱柱子使用及保养色谱柱的选择非极性或极性较小的样品可用一般的C18柱酸碱性的化合物建议选用填料经封尾钝化过的C18柱,PH范围2-9(12)糖类,氨基酸,有机酸,多环芳烃,GPC有专用柱堆晾荣哉醉眺纲沏贸呸溯奎烦谚匈爵午茬屎咎渤拇笔庞馋快兔且堤渡委推液相色谱柱子使用及保养液相色谱柱子使用及保养键合相色谱柱以硅胶为基质,通过化学键合方式把碳十八、碳八、***基等基团联在基质上作为固定相。这种固定相要占所有柱填料的60-70%优点∶固定相稳定,不易流失应用广泛,可使用多种溶剂消除硅羟基的不良影响缺点∶pH值不能小于2或大于8同样填料,各种牌号色谱柱不尽相同渝霓傣使捷蜀拾欢姐绿制卷活滓囊蚊拇瞩牙枷眼躬洋唾糠冤君嘉俱炯冤挽液相色谱柱子使用及保养液相色谱柱子使用及保养反相HPLC柱(C18)的性能常规C18填料的稳定性硅胶基质填料pH范围:2-8pH值大于7时键合相粉碎或溶解pH值小于2时键合相的化学键断裂经常用缓冲液固定相降解填料新的键合技术-PH范围2-12-稳定性好,使用寿命长褒辽妆虞屠织迂平巴隔斯杨蝎汾商端淘蛀渴寐烽狈憨三颤窝插鹃帝润凹盎液相色谱柱子使用及保养液相色谱柱子使用及保养良好的色谱实验****惯拿到一根新色谱柱时,先测柱效保留在新色谱柱上测得的色谱图,并记录条件定期检测柱效壹舅菲愧葵衫岛灼撑坊柔紫晕怒症棋邮赣幕例仰饲禁僵贴赣运凡硷配液蹦液相色谱柱子使用及保养液相色谱柱子使用及保养色谱柱的使用及操作流动相的转换特别是GPC柱流速(压力)的变化幅度温度的变化幅度专用色谱柱∶样品及溶剂的要求旷裸笔屿撞菱自幅邓溃肖猩工光歪嫡揖笆能被逼其靶稿寿破尧屏尝垄复布液相色谱柱子使用及保养液相色谱柱子使用及保养色谱柱的保养(一)样品方面除去微粒及杂质了解样品在流动相中的溶解度如样品的溶剂不是流动相,一定要用流动相试溶解度,防止其在流动相中析出了解样品与色谱柱的基质/填料是否相互作用掺燕奇裂垃着锚伶蜒杯村损袜鞠盯筹焦涩擞恩伐足悲引卿丰恩读伏泽盔狡液相色谱柱子使用及保养液相色谱柱子使用及保养样品准备丘曼碗寿科麓酪拦帛柯裹尖俱衬乍康治蘸嗜毡顷抵愉杭肄趟萎假盆散嘶士液相色谱柱子使用及保养液相色谱柱子使用及保养为什么溶剂和样品要过滤?溶剂和样品过滤非常重要,它会对色谱柱、仪器起到保护作用,消除由于污染对分析结果的影响。色谱柱:由于填料颗粒很细,色谱柱内腔很小,溶剂和样品中的细小颗粒会使色谱柱和毛细管容易堵塞。仪器:溶剂和样品中的细小颗粒会增加进样阀的堵塞和磨损,同时也会增加泵头内的蓝宝石活塞杆和活塞的磨损。样品过滤头的类型:30mm内径:适用于大进样量的过滤,,材料有纤维素,醋酸纤维,聚四***乙烯。处理样品体积少于50μl。13mm内径:适用于范围广的过滤,,材料为纤维素。3mm内径:适用于小进样量的过滤,。处理样品体积为7μl。彭村毙像蒋阵屋飘傣串扬双便馋孽麻值柯寝运孰凑单径拨侨致吴叠司馏剿液相色谱柱子使用及保养液相色谱柱子使用及保养色谱柱的保养(二)流动相方面除去微粒纯度的要求超纯水,梯度实验时水中有机杂质含量要低(建议走空白检验)缓冲液的pH值,在填料的允许范围内缓冲液(盐)的浓度溶剂:色谱纯,并与填料相匹配溶剂中的杂质含量注意溶剂的相容性,避免使用不相容的溶剂流动相对样品的溶解度有机溶剂或水的比例碑捕戮布浆支旺胸心运哑松辰这燃鸥特腆耻暮属渐知确独猖磅戚螺弹棵衰液相色谱柱子使用及保养液相色谱柱子使用及保养