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高效液相色谱定性定量分析方法讲义教材.ppt

文档分类：医学/心理学 | 页数：约37页举报非法文档有奖

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高效液相色谱定性定量分析方法讲义教材.ppt高效液相色谱定性定量分析方法申海艳2012-11-10色谱分析的目的:对未知组分进行定性分析对已知组分进行定量分析根据色谱图上某个色谱峰的保留时间和该色谱峰在检测器上的响应信号强度,对该谱峰进行初步定性定量分析。液相色谱定性分析液相色谱定量分析影响定量分析的因素用“标样”的保留值定出被测组份的位置标准加入法将已知标准物质加到待测样品中,若某一峰增高,且改变色谱柱或流动相组成后仍能使该峰增高,则可基本认定该峰与标准物质为同一物质。DAD检测器可同时比较保留时间和紫外光谱图。如果两项均一致,则可基本上确定为同一物质;如果保留时间一致,而紫外图谱有较大差别,则判定两者不是同一物质。两谱联用技术1如果标准物质缺乏或难以获得;或由于结构、理化性质相似,很多物质具有十分接近,甚至相同的保留值,则保留值定性准确度存在疑问。2可以运用红外光谱、紫外光谱、核磁共振光谱和质谱对化合物进行定性,目前两用技术有:HPLC-紫外光谱,HPLC-红外光谱,HPLC-MS,HPLC-NMR等。确定样品的类型,主要成分/痕量成分使分析条件的分离度(R)大于:,峰一致性测定检测限及定量限:确定灵敏度及线性范围用标样建立标准曲线检查方法的准确度及精确度用标样定期检查方法定量分析的具体内容准确度的衡量色谱方法是相对定量方法,如不考虑损失及杂质干扰等的因素,其结果同“标样”的准确程度关系密切一般的衡量方法是做回收率实验或不同方法之间的比较:相关系数相关系数:其中,X及Y分别代表不同方法的实验值及平均值

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