实验4. 酶的特异性.ppt

实验四酶的特异性生物化学实验之--【实验目的】学****酵母蔗糖酶(粗提液)和唾液淀粉酶的制备,了解酶的特异性及检测方法。【实验原理】酶是生物催化剂,酶对所作用的底物有严格的选择性,即酶的特异性。淀粉和蔗糖都是非还原性糖,分别为唾液淀粉酶和蔗糖酶的专一底物。淀粉被唾液淀粉酶水解生成具有还原性的麦芽糖,蔗糖被蔗糖酶水解生成具有还原性的葡萄糖和果糖。Benedict试剂(含有Cu2+)常用于检验还原糖的存在,其被还原后生成砖红色的Cu2O沉淀。【器材及试剂】(一)器材:、量筒、漏斗等(二)试剂:%%淀粉(%的NaCl)【实验步骤】(一):先用蒸馏水漱口,然后用洁净试管1支,取唾液(无泡沫)约2ml,蒸馏水20倍稀释,备用。,标号,按下表所列的次序操作:试剂试管编号123451%淀粉溶液(ml)———2%蔗糖溶液(ml)———唾液淀粉酶(ml)——(ml)——,置37℃恒温水浴保温10min,然后每管加入Benedict试剂2ml,再放沸水浴5min。观察各管颜色变化,并解释实验结果。(二):,置于研钵中,加少量蒸馏水及石英砂研磨提取约10min,再加蒸馏水至总体积约为20ml,过滤或离心,滤液或上清液备用。,标号,按下表所列的次序操作:试剂试管编号123451%淀粉溶液(ml)———2%蔗糖溶液(ml)———蔗糖酶(ml)——(ml)——,置37℃恒温水浴保温10min,然后每管加入Benedict试剂2ml,再放沸水浴5min。观察各管颜色变化,并解释实验结果。【注意事项】唾液的稀释倍数因人而异,有时差别很大,稀释倍数可以是50~300倍。【思考题】1、若将淀粉酶和蔗糖酶煮沸1min,实验结果会发生什么样的变化?2、酶作用的专一性有哪几种?