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蛋白质浓度的测定实验报告.doc

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蛋白质浓度的测定试验原理考马斯亮蓝能与蛋白质的疏水微区相结合,这种结合具有高敏感性。考马斯亮蓝G250的磷酸溶液呈棕红色,最大吸收峰在465nm。当他与蛋白质结合形成复合物时呈蓝色,其最大吸收峰改变为595nm。考马斯亮蓝G250—蛋白质复合物的高消光效应导致了蛋白质定量测定的高敏感性。在一定范围内,考马斯亮蓝G250—蛋白质复合物呈色后,在595nm下,吸光度与蛋白质含量呈线性关系。故可用于蛋白质浓度的测定。试验设备与试剂设备:普通离心机,721型分光光度计试剂:标准蛋白液(100ug/ml)实验材料新鲜绿豆芽实验内容标准曲线的制备取9支干净的试管,按表进行编号并加入试剂。管试剂1(空白)23456789标准蛋白液/%nacl/ml考马斯亮蓝染液/ml蛋白质含量/(ug/ml),研磨成匀浆,离心分离(4000r/min,10min)。%nacl定容到10ml。含量测定另取两只干净的试管,,,混匀。室温静置3min,与波长595nm处比色,读取吸光度。实验结果标准曲线结果如表所示,并以吸光度为纵坐标,个标准液含量为横坐标做标准曲线。,根据直线方程求出每支试管中蛋白质含量。:绿豆芽蛋白质含量=:,感谢你们的配合!

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