国家重点基础研究发展计划.doc

国家重点基础研究发展计划(973计划)课题6任务书一、研究内容宿主主要通过TLRs和NLRs等模式识别受体对侵入病原进行识别,并经相应信号转导通路精细调控针对不同病原的先天免疫细胞激活、细胞因子分泌、Th细胞极化、胞外陷阱、细胞自噬等先天免疫应答反应,以清除侵入病原。本课题针对宿主抗寄生虫感染先天免疫信号转导通路这一关键科学问题,分别以新孢子虫、泰勒虫等原虫,捻转血矛线虫、片形吸虫等蠕虫为研究对象,以期在牛羊抗寄生虫感染先天免疫研究方面取得突破。研究内容::(1)参与识别寄生虫的TLRs分子及下游信号通路的鉴定:利用免疫组学等技术,鉴定宿主参与识别新孢子虫、泰勒虫、捻转血矛线虫及片形吸虫的TLRs分子及相应信号通路。(2)TLRs信号通路下游核转录因子及细胞因子的检测:利用免疫芯片等技术,分别对新孢子虫等上述4种寄生虫感染时宿主TLRs信号通路下游核转录因子激活及细胞因子分泌进行检测。(3)TLRs信号通路对宿主先天免疫应答反应的影响:利用基因敲除等技术,选择性激活或阻断TLRs信号转导通路,观察寄生虫对先天免疫细胞激活、Th细胞极化、细胞自噬或胞外陷阱等免疫应答反应的影响,发现提高宿主抗上述4种寄生虫感染能力的TLRs信号转导通路的关键干预节点。:(1)参与识别寄生虫NLRs分子的鉴定:利用免疫组学等技术,鉴定参与识别新孢子虫等上述4种寄生虫的NLRs中NOD家族和NALP家族成员分子。(2)NLRs信号转导通路下游核转录因子、炎症小体及细胞因子的检测:利用免疫芯片等技术,检测宿主感染上述4种寄生虫后,NOD家族信号转导通路核转录因子激活及细胞因子分泌;检测NALP家族通路下游炎症小体的形成。(3)NLRs信号转导通路对宿主先天免疫应答反应的影响:利用RNAi等技术,选择性激活或阻断NLRs信号,观察对免疫细胞激活、Th细胞极化、细胞自噬或胞外陷阱等免疫应答反应的影响,发现提高宿主抗寄生虫感染能力的NLRs信号转导通路的关键干预节点。创新点和特色:本课题运用免疫组学、基因敲除等技术,以新孢子虫、泰勒虫、捻转血矛线虫及片形吸虫等为研究对象,探索宿主先天免疫信号转导在Th细胞极化、细胞自噬或胞外陷阱等先天免疫应答中的作用机制,以期发现提高宿主抗寄生虫感染能力的信号转导通路关键干预节点,将有助于深入阐明宿主抗寄生虫感染的先天免疫机制,从而为寻找诊断、预防和治疗家畜寄生虫病的临床新策略提供重要的理论基础。二、预期目标1、鉴定牛羊参与识别新孢子虫、泰勒虫、捻转血矛线虫、片形吸虫等寄生虫相关信号的TLRs和NLRs信号转导通路及核转录因子激活、细胞因子分泌或炎症小体形成特征。2、阐明牛羊TLRs和NLRs信号转导通路对免疫细胞激活、Th细胞极化、细胞自噬或胞外陷阱等先天免疫应答的调控机制,发现提高牛羊抵抗上述4种寄生虫感染信号转导通路的关键干预节点。3、发表SCI论文12~15篇,申请专利2~3项。4、培养学术带头人1~2名、学术骨干2~3名、博士后1~2名、博士及硕士研究生12~15名。三、研究方案及技术路线研究方案::(1)参与识别寄生虫的TLRs分子及下游信号通路的鉴定:1)建立寄生虫感染宿主细胞体外培养方法,接