RNAi介导抑制MCF--7细胞中VEGF基因表达.pdf

榈家种浦琢鱿赴蠽虮泶者:王立花指导教师:樊燕蓉副教授硕士学位论文作
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学位论文使用授权声明声明尸本学位论文是我在导师的指导下取得的研究成果,尽我所知,在本学位论文中,除了加以标注和致谢的部分外,不包含其他人已经发表或公布过的研究成果,也不包含我为获得任何教育机构的学位或学历而使用过的材料。与我一同工作的同事对本学位论文做出的贡献均已在论文中作了明确的说明。年弓月蟛日南京理工大学有权保存本学位论文的电子和纸质文档,可以借阅或上网公布本学位论文的部分或全部内容,可以向有关部门或机构送交并授权其保存、借阅或上网公布本学位论文的部分或全部内容。对于保密论文,按保密的有关规定和程序处理。研究生签名:
检测对细胞增殖的抑制、摘要关键词:;;;细胞增殖;细胞凋亡血管内皮生长因子,谴傺9苌さ最关键因子之一,而血管的生成在肿瘤的生长过程中起着至关重要的作用。扇,赴际跏且恢指咝У亍⑻匾煨缘匾种颇康幕虮泶锏募际酰因此利用技术抑制基因表达,可以抑制血管的生成,抑制肿瘤细胞的增殖。本实验将构建的三种靶向的质粒及四种化学合成的醚衾胱又质体转染的方法将其体外转染到人的乳腺癌细胞中,应用细胞生物学的方法检测其抑制基因表达及抑制肿瘤细胞增殖的作用,以期为扇旁谥琢鲋瘟方面的研究提供有效的实验依据。本论文主要通过以下几个方面对靶向的质粒及醒芯浚首先通过昙堑腣弑泶镏柿.●疆转染细胞,以转染时间、转染试剂浓度比及细胞接种密度为条件进行转染最佳条件的筛选实验;将靶向的三个柿7直鹩隚标记的高表达质粒依照最佳转染条件进行共转染,利用倒置荧光显微镜观察柿对基因表达的抑制情况,利用ḿ觳鈖质粒对细胞增殖的抑制情况;、的合成及蛋白表达抑制情况,从四种不同的猩秆〉玫揭种菩Ч詈玫囊恢将筛选得到抑制效果较好的化学合成的/进行进一步研究,利用活体细胞在线培养系统、/双染色及流式细胞术检测硒/对细胞的增殖抑制情况及其促凋亡作用。硕士论文介导抑制细胞中基因表达
./、./、/.,./,篗;;;.甌:,甌//··瑆、航籄硕士论文Ⅱ
录目要⋯.⋯.⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯......⋯⋯..⒁裕⒆罴炎H咎跫纳秆邢騐柿R种芃一赴鲋场靶向血管内皮生长因子的肿瘤抗血管生成的基因治疗⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.9苌稍谥琢錾芍械淖饔眉爸琢鲅9苌傻牡鹘谝蜃印家族及其受体⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..生物学功能⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..訴癡为靶点的肿瘤治疗⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..及其在肿瘤基因治疗中的应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.的发现⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..机制的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.技术的优势⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.在肿瘤治疗中的作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..抑制肿瘤细胞中基因的表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯课题的研究背景及研究意义⋯⋯⋯.:⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯昙堑腣弑泶镏柿WH綧细胞株⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...笛橐瞧饔胧约粒弧实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.摘....................................................】.硕士论文介导抑制赴蠽虮泶
因表达.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯.盏糓细胞凋亡⋯⋯....⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⑿〗嵊胝雇实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...赴嘌实验结果与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...ü庀晕⒕⒒Ш铣伤闹职邢騐虻膕抑制赴鲋臣皏实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯⋯..。⋯..实验结果与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..Ш铣傻腶癕细胞株⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..钐逑赴嘌低臣嗖鈇种芃细胞的增殖⋯⋯⋯./双染色检测/诱导细胞凋亡⋯...魇较赴跫觳鈇盏糓凋亡⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.课题小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.—