BowmanBirk型大豆胰蛋白酶抑制剂的分离纯化及性质研究.pdf

东北农业大学
硕士学位论文
Bowman-Birk型大豆胰蛋白酶抑制剂的分离纯化及性质研究
姓名:王长良
申请学位级别:硕士
专业:应用化学
指导教师:张永忠
20080620
./,值的变化对囊种苹钚缘母谋涫强赡娴摹S滞ü笛榛乖胰蛋白酶抑制剂广泛存在于动、植物和微生物中,泛指具有抑制胰蛋白酶活性作用的多肽或者蛋白质。研究表明大豆中至少含有忠鹊鞍酌敢种萍粒壳捌渲兄挥锌饽嶙,、包曼一伯克狟珺街掷嘈鸵种萍帘环掷搿对粗奶崛⊙芯俊J紫炔捎靡掖级訠进行进取,通过单因素实验确定了比较适宜的乙醇提取条件,包括乙醇浓度%.一%、液料比掖贾柿俊胃稍锿阎蠖狗壑柿縢~提取时间~吞崛∥露妗H缓罄谜皇匝榈贸鲎罴训囊掖继崛√跫#乙醇浓度%,液料比掖贾柿俊胃稍锿阎蠖狗壑柿縢,提取时间崛∥露℃。乙醇提取后,又采用等电点法。调值,—型大豆胰蛋白酶抑制剂的等电点为,使胰蛋白酶抑制剂在等电点时达到最大沉淀,然后加入***,沉淀溶液中的胰蛋白酶抑制剂。并做单因素实验得出最佳***用量为:***质量鱬岛笕芤褐柿縢。再进行超滤,选出超滤的各项参数。包括超滤压力宋露妗W詈蠼姓婵崭燥得出粗濉8軧ò醋罴岩掖继崛√。根据ㄒ許公司1曜计凡獾肂粗晶体中淖芎课%。对粗炕难芯俊1臼笛椴捎肈胱咏换徊阄龊蚐褐耍得出的纯品,根据ㄒ許公司1曜计凡獾檬笛樗么科反慷任%。‘采用ú舛˙抑制活性,。对种苹钚杂跋斓囊蛩赜形露取怠⒒乖痢7直鹪诓煌奈露认处理M辈捎肂法测定种埔鹊鞍酌肝舛缺浠怠5贸鯞的热稳定性。配采用甀疞的柠檬酸一柠檬酸钠缓冲液:,:.捎肙./腡瓾缓冲液;采用疞甘氨酸一氢氧化钠缓冲液,∈保俟鄄其抑制活性的变化。訠的抑制活性的影响得出曰乖烈灿泻芮康奈榷ㄐ浴本实验也对氖Щ罱辛搜芯俊2捎贸ǚā3德饰诓煌某时间处理下,测定种苹钚浴7⑾衷某珺完全欠活。关键词:胰蛋白酶抑制剂;怀耍晃榷ㄐ裕怀
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:曼荭良学位论文作者签名:宅缪艮一日期:矽·矽年乡月哆日日期:加醒年石月哆日学位论文版权使用授权书独创声明翅逡查墓丝益噩挂别壹魉鲍:奎拦亘窒蚱渌逃沟难换蛑本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含未获得书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。C艿难宦畚脑诮研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其密后适用本授权书研究生学位论文独创声明和使用授权书。
蛋白酶抑制剂的分类肽或者蛋白质,能与相应的蛋白水解酶形成一定的动态平衡,调节生命体内许多重要的生命能削弱或者阻断昆虫消化道内的蛋白酶对植物蛋白质的消化作用而使昆虫非正常发育或死胰蛋白酶抑制剂广泛存在于动、植物和微生物中,泛指具有抑制胰蛋白酶活性作用的多活动。胰蛋白酶抑制剂具有广泛的生物活性和作用,对于急性腺炎、肺气肿、出血性和败血性休克等疾病有独特的疗效,植物来源的胰蛋白酶抑制剂还有抗某些病虫害的天然防御功能,亡。而胰蛋白酶抑制剂在植物中广泛存在,主要分布在豆科,禾本科等植物中。大豆属于蝶开形花科,大豆属。别名黄豆。我国许多古书上曾称大豆为菽,《诗经》中就有:“中原有菽,庶民采之”的记载;西晋杜预对菽字注释:“菠,大豆也”;秦汉以后就以豆字代替菽字了。大豆原产于我国,据推算,我国种植大豆已有多年的历史。欧美各国栽培大豆的历史很短,大约在世纪后斯才从我国传去。本世纪年代,大豆栽培已遍及世界各国。已研究表明大豆中至少含有忠鹊鞍酌敢种萍粒渲兄挥锌饽嶙,、包曼一伯克狟珺街掷嘈鸵种萍帘环掷搿F渖灾嗜绫聿:表隑的生化性质生化性质分子量氨基酸残基数等电点二硫键对热、酸的稳定性不稳定稳定蛋白酶抑制剂毡榇嬖谟谧匀唤缰小T谥参铩⒍锛拔⑸镏芯械白酶抑制剂在存在。目前已发现的蛋白酶抑制剂数量庞大,根据其抑制的蛋白酶种类基本上可将它们分为丝氨酸蛋白酶类、巯基蛋白酶类、羧基蛋白酶类及金属蛋白酶