中山大学
硕士学位论文
新生食管再血管化的病理组织学研究——VEGF、Endostatin、
CD105、CD34及MVD在新生食管不同时段的表达变化
姓名:郝崇礼
申请学位级别:硕士
专业:肿瘤学
指导教师:张兰军
20090513
新生食管再血管化的病理组织学研究中文摘要在新生食管不同时段的表达变化一、、癕业:肿瘤学研究背景:材料与方法:人工食管的构建、动物模型建立及人工食管植入专学位申请人:郝崇礼导师:张兰军教授人工食管研究一直足食管重建外科的热点研究方向,年等【坷用橡胶管构建人工的实验开辟了人工食管研究的先河,近半个多世纪以来国内外学者采用多种材料进行人工食管的构建取得了长足的进展,因新生食管再生及术后狭窄而制约了人工食管的进一步临床应用。前期的动物实验【】的病理大切片观察表明,人工食管植入犬体内后可诱导出新生食管再生,并可观察到较完整的上皮化过程及部分高级结构〔恪⑾偬宓的再生,同时,在新生食管组织中还可以看到部分血管牛成。在此过程中,再血管化是新生食管得以存活、重塑的关键所在,本研究拟通过免疫组织化学方法研究不同促血管牛成及调节因子参与新牛食管再血管化的过程及机制。选取健康猪晒愣ü谖馍镉邢薰咎峁煲周膔辛动脉为原材料进行清洗,以环氧交联法进行组织处理,并以氨基酸溶液进行漂洗及表面修饰,将中山大学硕士学位论文
标本取材、切片及染色方法:.±⒀9苊芏统计学处理处理后的猪主动脉剪制成长方形的片状材料,并在洁净工作台下以平制羊肠线缝制成内径,壁厚,长的人工食管,以生理盐水封存于密封胶袋中经照射消毒后备用。.瓯纠丛将前期动物实验斯な彻苤踩牒笥盏既律彻茉偕实验动物模型男律彻艽笄衅瓯窘腥〔模直鸲、鲈碌新牛食管标本各一例进行霾课原犬食管、吻合口上缘、新生食管上段、中段、下段、吻合口下缘、原犬胃娜〔模⒔惺瘛⑶衅缺赣谩应用免疫组化法检测、、个月的笛槿律彻艿墓布个部位的组织标本中、的表达情况,用昙茄管内皮细胞。.观察、的表达情况;.’法【刀。用软件包进行处理,组间比较用方差分析,非连续性变量以秩和检验,以2钜炀哂型臣蒲б庖濉中山大学硕士学位论文新生食管再血管化的病理组织学研究
峁标本的取材制备迪虑榭觳獾拇筇迩榭血管生成的大体情况表达情况表达情况泶锴榭本组资料中,为阴性表达酵.—;本组资料中共取材份个不同时段半霾煌课,免疫组化制片共牛碫牛琫牛珻片张,片张。.人工食管植入后鲈隆个月、个月、个月,在新生食管组织中都可以观察到毛细血管存在。鲈碌男律彻茏橹锌梢钥吹叫律9苤饕N挥谡衬げ及外膜层,所形成毛细血管大部分为一层不连续血管内皮细胞围成,甚至为数个内皮细胞组成的细胞簇,缺乏结缔组织,结构欠佳;鲈抡呖梢栽谡衬げ恪⒓〔及外膜层看到管壁由多层血管内皮细胞组成,管腔结构较鲈抡叱墒欤芮荒可见红细胞,其微血管密度明显较鲈抡叽螅醇焦芮唤峁钩墒斓南感⊙管;个月、个月者在粘膜层、肌层、外膜层均可观察到毛细血管网,毛细血管管腔结构完整,并可以看到部分管壁肌层较发达的细小血管。本组资料中,的表达情况较好酵.⋯,在鲈隆个月、个月、个月的上皮组织及部分肌组织中可以观察到阳性表达,部分为强阳性表达,但两两比较后发现,各组问差异无统计学意义。本组资料中,诓煌倍尾煌课坏难9苣谄は赴芯胁煌度的表达酵.⋯,其中在鲈隆鲈碌牟糠直瓯局锌晒鄄斓角阳性表达,具体情况参见谋泶锉浠昙疐述;中山大学硕士学位论文新生食管再血管化的病理组织学研究
:,为阴性表达酵...,、、个月的霾课灰来伪冉希以看出,原犬食管、原犬胃的微血管密度无差异,随着时问的向前推移,新牛食管的上、中、下段呈现出血管慢慢成熟的过程,即由单个内皮细胞或数个内皮细胞围成的毛细血管到管腔富有较厚肌层的小血管。在此过程中,可以看出鲈时,生成之血管尚不成熟,鲈率迸3芍9苈韵猿墒欤鲈隆鲈率牛成之血管结构基本稳定,新生食管的微血管密度相差不大,差异仅表现为个月时的新生食管组织中血管的管腔更显成熟。由于本组资料中样本量较小,故各组问两两比较,差异无统计学意义。分别对、、个月的标本群做比较,可以发现原犬食管、原犬胃的微墙虾玫男屡Q9鼙曛荆人工食管植入后可以动态地观察到新生食管再血管化的过程;再血管化过程是一个动态过程;随时间推移,新生血管结构趋于成熟,个月时新生食管再血管化状态基本稳定。新生食管再血管化的过程不排除宿主两端及原食管床的提供立体血运来源的可能性。新生食管;再血管化;形态学;机制;中山大学硕士学位论文新生食管再血管化的病理组织学研究
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