猪γ干扰素的表达及抗病毒活性的研究.doc

第50卷第11期

湖北农业科学


2011年6月
Hubei
Agricultural
Sciences
Jun.,2011
梁望旺1”,周丹娜1,杨克礼1,刘泽文1,段正赢1,邓均华1,郭

锐1,袁芳艳1,徐涤平1,田永祥1
(,武汉430064;,武汉430064)
摘要:利用RT—PCR技术从有丝分裂原刀豆素(ConA)诱导的长白猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增出猪
1干扰素的成熟肽基因(mPolFN-T),并将其亚克隆到原核表达载体pET一28a中,构建重组表达载体
pET—mPoIFN一1。经PCR、酶切及测序鉴定后,转化到大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达,经SDS—
PAGE和Western—blot检测,表明猪1干扰素获得了高效表达,并具有免疫活性, kDa,
、复性得到具有生物学活性的蛋白。利用细胞病变抑制法对其在H—
PRRSV/—。为进一
步研究猪叫干扰素功能奠定了基础和理论依据.
关键词:猪1干扰素;克隆;原核表达
中图分类号:￥858;Q78
文献标识码:A
文章编号:0439—8114(2011)11-2283—04
The Prokaryotic Expression and Its Antiviral Activity of Porcine Interferon-,/
LIANG

Wang—wan91一,ZHOU

Dan-nal,YANG Ke-liI,LIU

Ze-wenl,DUAN Zheng-yingI,DENG

Jun-hual,
GUO RuiI,YUAN Fang-yanl,XU Di-pingI,TIAN Yong-xian91
(
Animal Husbandry and Veterinary,Hubei Academy
Agricultural Sciences,Wuhan 430064,China;

Laboratory
Animal Embryo and
Breeding,Hubei Academy of ngricuhural Sciences,Wuhan
430064,China)
Abstract:For constructing

binant

expression


pET—mPoIFN一-y,the

mature

peptide

gene

for porcine

interferon-',/
(mPolFN-T)was amplified by
RT-PCR depending
the template
of total RNA which
isolated
from
the peripheral
blood
lymphocyte
of
ConA-sti