AD相关基因tau在斑马鱼中的表达图谱的研究.pdf

湖北大学
硕士学位论文
AD相关基因tau在斑马鱼中的表达图谱研究
姓名:徐宗芸
申请学位级别:硕士
专业:微生物与生化药学
指导教师:杜鹏
20090501
摘要/的主要原因,导致神经纤维内微管解聚、变形、扭曲、退化,从而引起老年老年痴呆,也叫阿尔兹海默症’珹是神经系统的退行性疾病。目前,已成为导致老年人死亡的第四位主要原因,仅次于心脏病、癌症及中风。因此,老年痴呆成了世界各国予以攻克的瞩目问题。鞍椎囊斐8叨攘姿峄浅鱿痴呆。目前蛞殉晌0⒍群D喙鼗虻难芯咳鹊悖莟基因在斑马鱼中的表达未见报道。为研究斑马鱼虻氖笨毡泶铮范ㄒ┪镒饔冒械悖疚难∮谜逶位杂交的方法,研究蛟诎呗碛闩咛ブ械氖笨毡泶锿计住2捎肦际酰隆得到蚱危,连接到载体上,转化到大肠杆菌中,运用菌落ㄑ粜钥寺 0被嵝蛄蟹治霰砻鳎肴恕⒓沂蟆⒆⋯傅耐葱苑直鸫锏%,%,%。通过体外转录获得地高辛标记的秸耄愿魇逼谂咛ソ性辉交,结果显示蛟诎呗碛愕脑缙诰槐泶铮褰谥蠹性谥泻竽员泶铮后的斑马鱼中没有明显表达。用红色荧光蛋白标记腞探针,用绿色荧光蛋白标记腞探针,原位杂交,用荧光素分子偶联的单克隆抗体与探针分子特异性结合,荧光显色剂显色后在荧光显微镜下观察,准确定位了虻谋泶镂恢迷谥泻脑,与泶锏南赴煌初步筛选了影响该基因表达的两种中药标准品,虽然效果不明显,但为后期研究该基因的功能和药物高通量筛选打下了基础,并对后期实验做出展望和计划。关键词:阿尔兹海默症;砌“;斑马鱼;原位杂交
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英文缩略语释义英文缩写英文全称中文全称
矽论文作掌签耋:锈争芬侈钦日期:溯年’多月/莎日湖北大学学位论文原创性声明和使用授权说明原创性声明学位论文使用授权说明灰本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均己在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,即:按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本;学校有权保存并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,并提供目录检索与阅览服务;学校可以允许采用影印、缩印、数字化或其它复制手段保存学位论文;在不以赢利为目的的前提下,学校可以公开学位论文的部分或全部内容。C苈畚脑诮饷芎笞袷卮斯娑作者签名:指导教师签名:期
第一章文献综述及研究目的意义模式生物斑马鱼生物学特点和研究现状式动物之一。目前,斑马鱼的研究涉及到多个领域,如发育生物掣,遗传学【浚庖学【浚死嗉膊,以及转基副等许多方面。并能大规模人工繁州。斑马鱼自孵出后鲈驴纱镄猿墒欤朴忝扛粢恢芸刹讯啻锛阿尔兹海默’,壮评夏瓿沾簦缭暧葾教授首次报道了一位岁的女性痴呆患者而命名的。它是以进行性记忆和认知功能障碍为主要临床特征。神经原纤维缠结,茿奶卣餍圆”洹,和束状细丝,槌伞的主要成分则是微管结合蛋白蛋白的正常功能是促进和稳定管蛋白和微管的组装,但械腡蛋白不同于正常烁叨染积外,该鞍椎闹匾I斐>褪且斐9攘姿峄约捌渌斐P奘危ㄌ腔化、异常截断作用等【。许多研究已经证实,囊斐P奘蔚贾耇成为毒性分子而聚积成蚐佣⑸窬O宋湫浴Q芯勘砻鳎琓的基因突变也可促进调查发现:我均年龄为、岁,患血管性痴呆的年龄多在岁左右。岁以上人群中患重度老年痴呆的比率达ヒ陨希辏吮嚷示蜕升到ァU庖皇荼砻髡业揭恢忠种芓表达的药物势在必行。由于具有性成熟早,.媸比杲钥刹眩也蚜看螅体外受精,胚胎透明和发育迅速等优点,已经成为脊椎动物发育学家的特别感兴趣的模斑马鱼属于辐鳍亚纲鲤科短担尼鱼属囊种硬骨鱼类,原产于印度东部、巴基斯坦、缅甸以及孟加拉国的小溪、稻田以及恒河中游地区,为小型的热带鱼类,成鱼体长,具有体型小,繁殖力强,生长快等优点,百颗,体外受精,卵及胚体均完全透明,已成为生物学研究的理想模式生物俊斑马鱼的研究最早始于世年代美大学蠫方法的研究,观察其胚胎发育过程并发展一些相关的遗传技术。他的研究组于年在上发表了第一篇具有深刻影响的论文。在这篇论文中,他们报导了斑马鱼的体外受精技术、单倍体诱导技术,建立了纯合品系,并介绍了斑马鱼的第一个自然突变体梢斐3⒔峁沟乃菪的异常磷酸化、加速木刍踔罭的形成【。斑马鱼云溲
.呗碛愕纳镅氐一T谄浜蟮募改曛校琒和他的同事先后报导了斑马鱼的卵裂特点、不同时期胚胎中细胞的发育命运等,并发现斑马鱼脑中的许多神经元的排列简单而有规律】,这些研究成果的报导,证明了斑马鱼适合用作模式动物,引起了许多发育生物学家和分子遗传学家的关注。成年鱼个体小,易于饲养成年斑马鱼个体长约塾闾逍蕹ぃ朴闾宸蚀蟆一个盛水的鱼缸可