双歧杆菌生理功能特性及其应用研究.pdf

东北农业大学
博士学位论文
双歧杆菌生理功能特性及其应用的研究
姓名:孟祥晨
申请学位级别:博士
专业:食品科学
指导教师:霍贵成

响消化道的健康状况,虽然此菌重要,但其作用机理尚需深入研究。,黝本濒通过体双歧杆菌生理功能特性及其应用的研究摘要τ肨液体培养基,比较了两株商品菌株糰珺籅I桃瞪晟ぜ安嵝宰从庞诶醋杂ざ啾愕男路掷胫辍双歧杆菌侨撕投锍Φ滥谥匾5纳硇韵妇拇嬖谥苯佑罢内及体外实验方法,共计七个实验,包括所研究菌的分离与鉴定:生长特性的研究;影响其存活因素的研究:对病原菌的生物拮抗;对肠粘膜的粘附与定植;对试验动物的免疫调解机理以及含双歧杆菌产品的开发,系统研究了该菌的生理功能与作用机理及其应,,,.的生长与产酸能力,发现:生长速度比快,产酸能力却弱,前者无明显的生长迟滞期,后者却相反。和廾飨缘纳こ僦期,培养,菌液吸光值分别为和。培养和达,其吸光值应用模拟胃液、胃液、肠液、肠胆盐环境,研究、、和目瓜逆环境特性。在酸性条件下作用,存活率分别为%。在加有胃蛋白酶的模拟胃液中作用,存活率分别为:.%、%。在含胰蛋白酶的模拟肠液中作用,存活率分别为:痮、%、%。、和幕罹娴ㄑ闻ǘ壬叨陆担%胆盐浓度条件下作用叩拇婊盥史直鹞6鳥诟鞯ㄑ闻ǘ忍跫拢均有生长趋势,这种趋势随胆盐浓度升高而下降。。、、虰直鹩肷趁攀暇餐嘌∈焙螅叭呤股趁攀暇木低于/,而中却为×/。将值接近乃闹昃纳锨逡汉蚈、囊宜幔樗旌纤嵋阂砸欢ū壤尤肱嘌校嘌趁攀暇⑾炙嵋对沙门氏菌的抑制作用最强:、和锨逡旱囊种魄慷认嘟ú患八嵋海築上清液的抑制作用最差。。通过扫描电镜观察细菌在仔猪肠粘膜的粘附状况,发现肠道菌群与粘膜表面的粘液层有密切的联系。采用放射性代谢标记方法研究双歧杆菌与仔猪肠粘膜粘液糖蛋白的粘附,发现的粘附能力最强,为%;其次是%。相同的实验方法观察到:所实验的糖、初乳粉以及、、大肠杆菌和沙门氏菌上清均能导致粘附下降,而和锨迦从写俳湔掣降淖饔谩两株由产品分离菌株,;分别为%和%:和分别是和中文摘要用。%、%孟祥晨%、年
的特异性和非特异性免疫功能。卜—≯母粉,低聚糖取代%的蔗糖,接菌量为%。条件下发酵,然后再按簂的比双歧杆菌,生堡持性,生长,病原菌,粘附,免疫调节,应用应用动物实验方法,研究和对正常小白鼠免疫功能的调节作用以及对免疫力低下模型动物的预防与治疗作用。发现:两株菌对正常小白鼠体重、脾/体重和肾/体重比无显著性影响;对肝,体重比有增加趋势;能显著增加血液中、、、、=峁砻鳎毫街昃寄茉銮空疌小白鼠的免疫功能,并具有良好调节肠道菌群能力,效果优于。同时对/“资笫┮曰妨柞0泛退绺司⑾郑夯妨柞0返贾绿逯亍⑿叵/体重、、,两株菌能显著预防..虸的下降酊珺Ч庞贐云渌父鲋副暧星嵛⒒指醋饔茫Ч不显著。两株菌都可增加双歧杆菌与乳杆菌的数量,降低大肠杆菌数量∞对免疫力低下的昆明小白鼠模型施以双歧杆菌后发现:两株菌对胸腺,体重、..南陆涤星嵛⒒航庾饔茫Ч幌灾D芟灾黾尤楦司退绺司氖档痛蟪Ω司氖。通过优化和增菌培养基,使吸光值提高%,使生长迟滞期持续时间缩短约鲂∈薄2捎糜呕跫瞥傻木墼条件下贮存两个月后,菌的存活率在通过研究和在脱脂乳中的生长特性、影响其发酵的因素以及发酵乳的方式优化双歧杆菌酸奶的生产工艺。发现:选用制作酸奶时,在乳中添加了%酵母粉,低聚糖取代%的蔗糖,接菌量为谎∮。。基于上述实验结果,本课题的结论是:和具有良好的生产和抗逆性条件性状,有极大的开发与应用潜力。双歧杆菌的生物拮抗作用是营养竞争和代谢产物共同作用的结果,代谢产物中除乙酸和乳酸外,还有其他机制在起作用。该菌的粘跗具有菌株差异性,以青春双歧杆菌的粘附能力最强;所实验的糖和初乳粉都可导致青春双歧杆菌的粘附下降,青春双歧杆菌上清能够促进其粘附:其粘附紊~部分存在于菌体表面,一部分存在于培养液上清中;双歧杆菌粘附素受体可能是糖蛋白:不只一种机制在介导其粘附。该菌具有增强正常/∽允筇匾煨院头翘匾煨悦庖吖δ茏饔靡约坝呕Φ谰航构的能力,对小白鼠免疫力低下无明显预防和治疗作用,但可以改善肠道菌群结构。本课题的创新点是:系统研究了双歧杆菌的生理功能与作用机理及其应用。通过比较该菌生长和抗逆性条件性状,筛选出具有工业开发价值的菌株。采用放射性代谢标记方法研究了双歧杆菌与肠粘膜粘液糖蛋白的粘附。理论上证实了双歧杆菌除乙酸和乳酸代谢产物,还存在其他的机制拈抗沙门氏菌;并证实了该菌可增强正