二氮嗪预处理H2O2损伤L6骨骼肌成肌细胞的作用.pdf

研究生签名:阳幄导师签章:钾专亥二级学院领导盖章隧塞:西孚年李年亥阳浙研究生签名:陈;学位论文使用授权及知识产权归属承诺研究生学位论文独创性声明河北医科大学本学位论文在导师蛑傅夹∽的指导下,由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文,第二署名单位为河北医科大学,试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则,承担相应的法律责任。埽:‘。幻,,年歹月嗳本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特别加以标注等内容外,文中不包含其他人已发表或撰写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写,文责自负。导师签章:日
劲琚煌ǘ菻訪的作用二氮嗪预处理对损伤骨骼肌成肌细胞的作用,蝴鹕耍订伤洲的作用,意图寻找提高移植细胞存活率、增强治疗效果的有效目的:缺血性心脏病是严重危害人类健康的疾病之一,目前的治疗包括药物治疗、介入、外科手术等治疗,虽然在一定程度上延缓了病程的发展,但却不能逆转己坏死的心肌,无法中断心衰的进展。细胞移植为病损心脏的细胞重建及衰竭心脏的功能恢复,提供了一种崭新的方法。研究结果表明干细胞移植能促进心脏血管和心肌细胞的新生,改善心肌血液供应,增强心脏功能。在细胞移植的众多研究中,骨骼肌成肌细胞移植因有更广泛的临床应用前景更是受到科学家的青睐。骨骼肌成肌细胞存在于骨骼肌肌膜和基膜之间,是骨骼肌细胞的前体细胞。骨骼肌成肌细胞作为供体细胞有很多理想的特性,如在体外未分化状态有增殖能力,在缺血组织载体等。这些优点使骨骼肌成肌细胞成为心脏干细胞移植主要的干细胞种类之一。但是移植后干细胞在宿主心肌受损的微环境中存活率极低,严重影响细胞治疗的效果。急性心梗后氧化酶与抗氧化酶的平衡被打破,活性琑谛墓G头切墓G撸要因素。减少缺血应激时的细胞凋亡,提高移植细胞存活率,增强细胞移植的治疗效果是目前急需解决的问题。本研究采用过氧化氢体外诱导骨骼肌成肌细胞氧化应激损伤模型,观察二氮嗪,ご矶匝趸に体外培养骨骼肌成肌细胞,损伤组ǘ确直鹞狾.、壬ǚḿ觳飧髯橄赴盍Γ饔盏糎趸鹕说氖实迸ǘ燃笆摘要内仍然能够成活,用自体成肌细胞移植,无免疫排斥反应,可作为基因的氧化物化应激持续存在。梗死心脏中增高的活性氧化物是诱导移植细胞凋亡的重方法。方法:,,用诱导鹕恕J笛榉终6哉组畂.、疞,作用时间为小时、小时、小时Mü中文摘要
緊疞、煌ǘ菵ご矶訪淖饔,实验分正常对照组洲的保护实验模型。预处理对损伤湖的作用体外培养骨骼肌成肌细胞。实验分正常对照组煌ǘ菵ご矶訪的作用检测结果提示,经预预处理对损伤淖饔间,建立洲氧化应激损伤模型。煌ǘ菻訪的作用觳饨峁崾荆孀臜ǘ体外培养骨骼肌成肌细胞,损伤组中先加入终浓度为////亩嗪孵育分钟,再换为含畂疞的培养基作用小时诱导损伤。通过壬ǚḿ觳飧髯橄赴盍Γ鄄觳煌ǘ榷`涸ご矶过氧化氢损伤后细胞活力的影响,摸索的适当浓度,建立预处理损伤比色法检测各组细胞活性;检测各组培养液中乳酸脱氢酶坎⒓扑鉒的释放率,评估细胞膜损伤情况;光镜、电镜观察细胞的形态学变化;流式细胞术测定细胞凋亡率、细胞周期;免疫细胞化学染色检测釩、、、:的升高,作用时间的延长,细胞活力逐渐降低,呈明显的剂量和时间依赖性。我们选择引起细胞活力下降%左右的浓度./作用鹕四P汀处理后,细胞活力呈上升趋势。与组相比较,/ǘ茸橄赴舛戎值灾仙/与/ǘ茸橹湮舛戎滴尥臣蒲Р钜欤颐茄≡/孵育⒈;な笛槟P汀觳庀允荆胝6哉兆楸冉希琀榈南赴盍γ飨韵陆担./珼ご.:在培养基琀鹕俗畂疞,,预处理组与组比较,组的细胞活力明显上升;组与正常对照组的细胞活力相比较无明显差异。中文摘要/疞、.
膜周边。预处理可明显改善所致的洲损伤表现。,作用洲小时为适合本实验洲的形态变化,组的收缩,部分变成圆形,核收缩流式细胞仪分析,预处理可以减少诱导的洲凋亡,促进洲增殖。可诱导洲损伤,并且具有浓度和时间依赖性。我们选择使细觳庀允荆胝6哉兆楸冉希琀榈腖含量明显增高;与组比较,组的棵飨越档停愿哂谡6哉兆椤变小,核质致密浓染或呈碎块状致密浓染;电镜显示部分细胞表面出现较多的球状突起及皱褶,细胞核异染色质边集,并逐渐凝聚成新月状附于核、、鞍妆泶镂廾飨圆钜臁椴糠窒赴赴谻的免疫反应性明显增强并呈弥漫性片状分布,表明细胞色素上吡L释放到胞质;组与正常对照组细胞胞浆中棕黄色颗粒分布均匀,,,两组存在差异,而鞍妆泶铮阶榧湮薏钜臁胞活力下降%左右的疞研究的最佳条件。`涸ご矶匝趸に鹕薒哂斜;ぷ饔茫淇梢晕窒赴膜、线粒体膜的完整,防止细胞形态结构发生改变,促进