米诺环素对戊四氮致痫大鼠海马的保护作用.pdf

河北医科大学
硕士学位论文
米诺环素对戊四氮致痫大鼠海马的保护作用
姓名:董天津
申请学位级别:硕士
专业:儿科学
指导教师:施荣富
20080301
研魁签确三一导师签砌警学院领导虢多卜碲年乡月汐旷≯吼鬈气≥孓研究生签名欹净学位论文使用授权及知识产权归属承诺河北医科大学研究生学位论文独创性声明承担相应的法律责任。本学位论文在导师蛑傅夹∽的指导下,由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文,第一署名单位为河北医科大学,试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则,本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写,文责自负。导师签名:
米诺环素对戊四氮致痫大鼠海马的保护作用氨基酸。在癫痫、脑外伤号慢性退行性神经疾病等病理过程摘要癫痫且蛔橛纱竽陨窬R斐7诺缢起的以短暂性中枢神经系统功能失常为特征的慢性脑部疾病。癫痫发作可导致神经元损伤,其中有一部分是通过细胞凋亡实现的。其中受体介导的兴奋性毒性是神经元损伤的重要机制之一。谷氨酸是脑内最主要的内源性兴奋性中,谷氨酸通过激动其突触后膜谷氨酸受体产生兴奋性毒性,参与神经元损害,以受体介导的兴奋性毒性为主。受体亦可介导癫痫脑损伤病理中神经胶质细胞活化及产生损伤性物质鏸琁等头拧C着祷匪盐酸二甲***四环素,为第二代人工半合成四环类抗生素,其抗菌谱与四环素相似。近年一些研究表明,在脑缺血、脑外伤、阿尔茨海默氏病和帕金森病及边缘叶癫痫发作大鼠模型上,米诺环素均有显著的神经保护作用。由于米诺环素口服后迅速被吸收,脂溶性较高,组织穿透性好,且可以通过血脑屏障作用于中枢神经系统,所以更加引起人们的重视。目前,已报道该类药物神经保护作用的一些机制,米诺环素在各种模型上均表现出了神经保护作用,但其在全身性癫痫模型上对神经元的保护作用,以及药物剂量与神经元的保护作用的关系尚未报道。在全身性癫痫模型中米诺环素能否拮抗受体,能否抑制中文摘要
受体介导的兴奋性毒性,其抑制受体的兴奋性毒性是否通过直接环节发挥作用,米诺环素能否减少凋亡的发生是本实验关注的焦点。目的:用戊四氮,制造癫痫大鼠模型,用不同剂量的米诺环素进行干预,检测海马区中细胞凋亡,海马区受体型亚单位泶情况,进一步探讨不同剂量米诺环素对致痫大鼠神经元的作用,米诺环素是否能直接拮抗。方法肿采用完全随机设计。将只成年雄性狣大鼠随机抽取蛔魑UW溆挥梦四氮制造癫痫模型,筛选造模合格大鼠只随机分为:戊四氮致痫组椭吗锖竺着祷匪孛看痥稍ぷ⒅吗锖竺着祷匪孛看痥稍ぷ、致痫后米诺环素每次/干预组炷正常组腹腔注射生理盐水,致痫大鼠按/腹腔注射芤海看巫⑸浼涓保钡降闳出现。各米诺环素干预组于癫痫终止后分钟内给予米诺环素灌胃。槭准粮痥院竺∈备/。槭准粮痥院竺∈备/。槭准粮/,以后每时给予/。楹驼W楦枵袅笏辔竏共灌胃臁中文摘要
正常组与其它各组之间比较,正常组光密度值最低都具有显著性差异。戊四氮模型缘缤将大鼠麻醉后固定于固定架上,采用头皮针状电极单极导联法,于大鼠顶骨正中左右两侧头皮下处留置针灸针,待大鼠清醒后制作模型,观察痫性放电的频率及其振幅变化。庖咦橹旧麻醉状态下经左心室行主动脉插管,ザ嗑奂兹┤芤进行灌注,取脑固定,常规包埋,标本冠状位石蜡切片。经过抗原修复、小牛血清封闭后,抗体,在经二抗、三抗孵育,陨ê笾孟晕⒕迪鹿鄄旒锹肌荒┒吮昙荄片段灌注,固定,常规包埋,切片同上。经脱蜡、蛋白酶消化后,加入从σ海渭痈春弦海珼显色,置镜下观察。结果拆镄形Q造模大鼠均出现不同程度的痫性发作,造模成功。致痫大鼠脑电图出现阵发尖波。正常对照组大鼠脑电无异常。庖咦橹Ы峁组与米诺环素各干预组之间比较,,免疫组织化学染色后,正常组阳性细胞在大脑皮质各层内弥散分布,在海马主要分布于锥体细胞层及颗粒细胞层。其它各组与正常组相比,中文摘要.。
大脑皮层及海马免疫反应染色明显加深,数目增多。觳釺结果橛隡组比较,,具有显著性差异;镸组比较,组细胞凋亡多,具有显著性差异;各干预组之间比较,橄赴蛲鼋螹组、槎忌伲邢灾性差异。隡组比较,赴蛲数少,有显著性差异。正常组与其它各组比较,组细胞凋亡数目少,有显著性差异。结论着祷匪孛看痥芗跎傥焖牡V吗锎笫竽院B砬经元凋亡。米诺环素每次/不能减少致痫大鼠海马区神经元凋亡,反而加强大鼠脑神经元凋亡。米诺环素对海马神经元的作用具有双向性。着祷匪夭荒芗跎貼难粜员泶铮赡芷洳荒苤