能力单元八 血清学检验与生物制品
一血清学检验定义:抗原及相应抗体在体外的特异性结合。在体外能发生可见的免疫反应。抗体主要存在于血清中,将这一反应称为--。(一)血清学试验的特点:1、特异性:抗原决定簇的组成、结构不同,所产生的抗体也就不同,一种抗原只能与相应抗体结合,表现出高度的特异性。2、交叉性:(二)用已知测未知:用已知抗原(抗体)监测未知抗体(抗原)。
(三)最适比与带现象:最适比:抗原与抗体结合需要适当比例才能出现可见反应。带现象:如抗原过多或抗体过多,大的抗原抗体复合物很难形成,不能出现可见的反应。
(四)反应的可逆性:正常:温度:0-40度,PH:4-9。当T>60度,PH<3时,发生可逆反应。
(五)反应的两阶段型:第一阶段:抗原抗体相互结合,作用快,形成的复合物较小,不出现可见反应。第二阶段:在电解质作用下,形成大的复合物,出现各种可见反应,反应慢。(六)反应的敏感性:极微量的抗原或抗体都能检测。
二影响血清学实验的因素
1、电解质:常用的是氯化纳,%生理盐水,促进可见现象的发生。2、温度:37度,适宜的温度可增加抗原抗体活性及相互接触的机会。3、PH=,PH=5-,非特异性沉淀,PH=2-3,离解。
4、振荡:加速碰撞,但过强可解离。5、杂质:蛋白质、脂质、糖等杂志时,抑制反应进行,或引起非特异性反应。故实验设立对照。
三、血清学试验的类型:
(一)凝集试验:颗粒性抗原与相应抗体结合后,在电解质存在下互相凝结成絮片状团块的现象。参与的抗原为凝集原,抗体为凝集素。
1、直接凝集试验:(1)平板凝集试验:例如:沙门氏菌,痢疾杆菌,布氏杆菌病,血型鉴定。(2)试管凝集试验:抗原等量,抗体作倍比稀释,37℃,50%以上为该血清的效价(滴度)。例如:布氏杆菌病,沙门氏菌。
2、间接凝集试验:将可溶性抗原(或抗体)吸附与免疫无关的颗粒表面,再与抗体结合,出现肉眼可见的凝集现象。间接血凝试验:以红细胞为载体。正向血凝实验:红细胞+抗原抗体。反向血凝试验:红细胞+抗体抗原。
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