利用mRNA差异显示技术对甜菜M14品系花期特异表达基因的研究.pdf

黑龙江大学
硕士学位论文
利用mRNA差异显示技术对甜菜M14品系花期特异表达基因的研究
姓名:高传军
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学·植物分子生物学
指导教师:李海英
20060612
中文摘要╳腑,,然后在ゾ郾0纺荷戏掷搿4幽荷匣厥詹钜炱魏蠼甜菜单体附加系废,是栽培菜旧遄楦郊佣“谆ㄌ鸩号染色体。为研究甜菜ㄆ谑潜麓嬖诨虻牟钜毂泶铮媚孀>耙聚合酶链式反应:.将来自千甜荒投哉詹牧栽培甜菜ㄆ诘膍孀B己铣行反向斑点杂交验证,继而对于杂交为阳性的片段测序,使用ぞ呓ú庑蚪峁隚数据库淖柿辖行蛄斜缺鹕竇步结果为:得到跆鸩薓花囊特异表达基因的序列,长度分别为、。这些片段可用于甜菜花期特异表达基因的分析。关键词:::反向斑点杂父;,
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第虑把代“绿色革命”之后的又一次农业革命一~无融合生殖革命】。植物无融合生殖概述,”S捎诿挥芯讶诤瞎淌沟米哟蛐陀母本基因型精确相同,子代继承了母本固有的遗传特性,从而形成遗传上稳定的可由种子进行繁殖的无性系Mü肿咏蟹敝车闹参镂奕合生殖方式,可以用来固定有利基因型,改变育种程序及种子的生产过程,具有重大的经济意义,如果应用于重要作物,将是继世纪年由于无融合生殖可以保存优异的基因型、固定杂种优势、缩短育种周期,具有重大的科学和经济价值,长期以来是各国科学家关注的焦点。目前,世界上有几十个国家喔鍪笛槭掖邮挛奕诤仙车难芯浚年都有许多关于无融合生殖的文章发表卜縶热嗽瓿霭了专著《无融合生殖之花》;年和年分别在美国的德克萨斯和意大利的科莫召开了两次国际无融合生殖会议。年的大会吸引了个国家嗳瞬渭樱致鄯段Т游奕诤仙车幕啤⒔⒁糯ā⑾胞、胚胎、生态到它的经济意义,拓展了基础研究的范围。上述这些事实说明,植物无融合生殖已经成为生物学科中的研究热点。根据无融合生殖发生的完全程度,可将植物无融合生殖分为专性无融合生殖和兼性无融合生殖两类。其中专性无融合生殖无需经过受精自主发育,予代基因型与母本完全一致:兼性无融合生殖植株同时发生无
■■■目觥觥觥鰅目■■自植物无融合生殖的研究进展在禾本科、菊科、锦葵科和蔷薇科等野生种资源中,在重要的经济作物融合生殖和有性生殖,子代会发生性状分离。根据胚胎发生的起源不同,可将植物无融合生殖分为孢子体无融合生殖欢ㄅ和配子体无融台生殖两种。不定胚是由珠心或珠被细胞直接发育成胚,与有性共存表现出多胚现象。目粄『对不定胚了解较少,钡壤梅肿颖暌逊治鲈咏缓蟠掷肭榭觯衔2欢ㄅ叩囊糯ǹ刂极为复杂,至少包括鍪啃宰次坏配子体无融合生殖又可分为无孢子生殖和二倍体孢子生殖。其中,无孢予生殖是由珠心体细胞直接发育成胚囊后,由未减数卵细胞发育成胚;而二倍体孢子生殖是大孢子母细胞减数分裂受阻,由未减数胚囊发育成胚。根据未减数胚囊形成不同,配子体无融合生殖可分为掷嘈蚚:韭型⑵压⑿⒖噍げ诵上阈⑴畈菪⒌须型、山柳菊型⒒疾菪褪蛐自年钤绶⑾至酥参镂奕诤仙诚窒笠岳矗嗣且经在被子植物的鍪糁蟹⑾至宋奕诤仙程匦缘拇嬖冢饕7植中很少发现无融合生殖现象【啊S捎谥质艏湓咏徊磺缀希孟钟械脑交技术转移无融合生殖基因会遇到很大的困难,即便有少数杂交成功的,其无融合生殖特性的传递率也非常低,而且作物的营养生长也会受到很大的影响。在这方面的研究,国内外很多实验室做了大量的探索工作,如小麦和其近缘属披碱草杂交、玉米和其近缘属摩擦禾黑龙江大学硕士学位论文琎
涞脑咏弧S捎诙际鞘粲谥旨浠蚴艏湓咏唬柘拇罅的时间、人力、物力,并没有得到品质良好的无融合生殖后代。到目为止,还没有选育出可供利用的具有经济价值的作物品种。随着分子生物学和基因工程技术的飞速发展,人们又寄希望于克隆到这一基因,然后利用转基因技术将其转到其它重要的作物中。然而,分析一些研究比较深入的无融合生殖材料发现,无融合生殖材料多为多倍体,基因组数目庞大、杂合性较高,遗传学机理尚不清楚,如无融合生殖基因是显性还是隐性,是单基因控制、两对基因控制还是多基因控制,是单一位点还是多位点等问题都没有统一的结论。有报道认为大黍、毛莨的无孢子生殖为显性单基因遗传;而三倍体一年蓬”“”为两个独立位点进行传递【”】;摩擦禾桶谆ㄆ压的遗传是受多个不连锁位点控制的。无融合生殖性状作为~个孟德尔遗传单位还具有重组抑制的特点诶俏膊、臂形草⒀济┳茨Σ梁和雀稗与玉米或水稻的比较作图中发现,这些紧密连锁的分子标记分布在~厘摩的范围内,也就是说即便是紧密连锁的标记,它距离无融合生殖基因座的实际物理距离仍然很远。正是出于无融合生殖遗传分析的复杂性和无融合生殖位点的重组抑制特性,使得该基因的克隆具有很大难度。目前,许多科学