间接ELISA检测IBV DNA疫苗免疫抗体及IBV M基因表达研究.pdf

硕士学位论文四川农业大学间接检测呙缑庖呖固虮泶镅芯及陈萍彰/年
摘要%。结合抗体检测结果分析得出:三基因混合呙缑庖咝Ч庞因序列獳,设计了一对引物,采用方法,获得了虻闹刈檎婧吮泶分析表明:蛟诖蟪Ω司谢竦昧吮泶铮泶锏蛋白可作为制备诊断抗原,基因工程疫苗的基础材料。以上研究对本研究采用差速离心和密度梯度离心技术纯化禽传染性支气管炎病毒骎用纯化的靼豢乖⒘思觳釯呙缑庖吆蠹ρG逯刑匾煨钥固的间接椒āH范丝乖罴寻慌ǘ任/,待检血清稀释度为,酶标抗体的最佳稀释度为,血清样品阴、阳性判断临界值疦为应用间接椒ḿ觳釯呙缑庖呖固澹峁砻鳎篒的、駾疫苗单独免疫或混合免疫均能刺激机体产生特异性抗体;:母鱀疫苗对强毒攻击都有保护率,保护率分别是基因%/基因%、/蚧旌螪疫苗单基因呙缑庖咝Ч坏セ駾疫苗中,蛞呙绾蚇基因疫苗优于基因疫苗。根据本课题组在中注册的中国禽传染性支气管炎分离株的鮉基分离株膜蛋白基因娜诤媳泶锲危⒔淇寺〉絧载体测序。将此片段插入大肠杆菌原核表达载体校菇吮泶颕质粒甅,转化入大肠杆菌⒕璉杏盏急泶铩1泶锊锞和白分子量约为。在培养基、ǘ任猯/、温度为。浓度为/挠盏急泶锾跫拢鞍妆泶锪看锏骄遄艿鞍椎ァ1泶锏诊断、防治有重要理论价值和实用价值。关键词:鸡传染性支气管炎病毒患浣覧;颍淮蟪Ω司蝗诤媳泶狙芯康玫健笆濉惫腋呒际跹芯糠⒄辜苹苹项目资助
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知吩册彳月矽日研究生签名:磁、谇研究生签名:随瘁泓年挛泓年/月节日论文独创性声明关于论文使用授权的声明本人郑重声明:所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,学位论文中不包含其他个人或集体己经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得四川农业大学或其它教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。导师签名
荽拘灾苎撞「趴抗体检测方法的研究进展血凝抑制试验中和试验日昌触性传染病,其特征为病鸡出现呼吸道症状、产蛋数量和品质下降以及肾脏病变等。杆菌病等继发感染而提高鸡群的死亡率,给养鸡生产带来巨大损失【”。年的报道。我国于年由邝荣禄在广东省首先诊断出っ髁薎谖夜拇流行株因地区不同而有差别,但主要以、和株为流行株,变异毒株占%。自年以来,在我国大部分地区相继流行,其发病率ィ性,从而为我国新分离株的快速鉴定提供了依据。研究表明:应用埘对免疫鸡群出抗体,具有早期诊断的价值。但是目乖谱鞴瘫冉细丛樱て诒4嫘枰禽传染性支气管炎,羌Φ囊恢旨毙浴⒏叨冉禽传染性支气管炎病毒琁筛腥舅腥樟涞募Γ导致生长迟缓、死亡、增重和饲料报酬降低;还常常引起霉形体混合感染以及大肠仁状伪ǖ懒吮静。等嘲于年证实了乖嘌约捌在传染性支气管炎流行病学中的重要性,之后在世界其他很多国家和地区都有该病在【俊4昕J迹琁谖夜蠓段印M鹾炷谒拇ǖ厍掷爰定出了鲂投局辍M鹾炷对我国餍胁⊙У鞑樽柿舷允荆夜腎死亡率.%。国内每年由此病造成的经济损失超过十亿元。在规模化饲养条件下,感染率更高,病型更加复杂,防治难度更大,危害更加剧烈。因此,防治是禽病科研的热点和难点【薄淳聿痪哂心煜赴奶匦裕ň鹊鞍酌富蛄字竎处理后能凝集某些动物的红细胞建立了难D种剖匝榉椒ḿ觳釯抗体。吴延功等【梦夜掷氲腁型魏氏梭菌培养液处理螅⑾钟醒D进行检测时,应用与疫苗株同型的抗原最好。与其它血清学试验相比,可更早检冰冻,抗原效价不稳定,病毒的浓度与滴度不呈线性关系。从而限制了的应用和发展。试验可在鸡胚、鸡肾细胞和气管组织。上进行。可用于检测乖⒖固逡约把G逖Х中偷难芯俊<ε咧泻褪匝槭恰止爬隙删傻姆椒ǎ
:主要用于抗体检测原理:已知的抗原包被濉!<尤氪煅贰!C副昕箍固濉!5孜锵瓽萚酶腥炯嵋褐械目固遄鲋泻褪匝橐约觳饫嵋褐械奶匾煨钥固的效价。¨.疫群,则具有高度的敏感性和特异性。但它并不实用,因为作为常规检测过于与啾龋ù蟮奶岣吡耸匝榈牧槊舳~倍壹ù蟮乃醵塘思觳疫抗体检测,因为疫苗免疫后血清中沉淀抗体很低甚至呈一过性;且不适合在检测固宓难G逖Х椒ㄖ校噶C庖呶绞匝以其快速、简体的应用为贗的抗体检测中提供了可靠的保证浴D壳耙驯ǖ赖目捎榷圆捎肗觳釯特异性抗体的敏感性和特异