水合淫羊藿素Icaritin对K562白血病细胞诱导分化作用观察及机制研究.pdf

分类号 V D C 密级
七年制硕士学位论文
水合淫羊蕾素(Icaritin ) 对 K 562 白血病细
胞诱导分化作用观察及机制研究
D iffe r e n tia tio n 一in d u c in g E ffe c ts a n d M o le c u la r
M e c h a n ism s o f I c a r itin o n K 5 6 2 L e u k e m ia C e lls
作者姓名: 李星瑛
学科专业: 血液内科
学院(系、所): 湘雅二医院
指导教师: 张广森教授
论文答辩日期答辩委员会主席
中南大学
二 0 0 九年五月
原创性声明
本人声明,所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究
工作及取得的研究成果。尽我所知,除了论文中特别加以标注和致谢
的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不
包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我
共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。
作者签名: 日期年工月显日
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并通过网络向社会公众提供信息服务。
作者签名: ”师签名-班连= 日期:辫年如少
七年制硕士学位论文中文摘要
摘要
研究背景: 慢性粒细胞白血病(chron ic my elog en on s leuk e而 a,
C M L ) 是一种起源于多能造血干细胞的恶性克隆性疾病,其白血病细
胞具有特征性的 t(9:22)(q34 ;q 11) 染色体易位(p h 染色体) 并形成
B cr/Ab l 融合基因。该融合基因编码的 pZ ro B cr/A bl 蛋白具有极强的
酪氨酸激酶活性,可使白血病细胞发生增殖失控、分化受阻和凋亡障
碍等改变。C M L 的治疗方法主要包括经基脉、a一干扰素、异基因造
血干细胞移植和近年来成为 C M L 慢性期一线治疗的甲磺酸伊马替尼
(格列卫,Im atinib ,S T I57 1)。上述治疗方法的应用,较大的改善了
C M L 的预后,但目前临床上仍存在如格列卫耐药,C M L 进展期治疗
效果不佳等棘手的问题。因此,寻找新的治疗方法仍是 C M L 研究的
主要目标之一。
K 562 细胞系是人类红白血病细胞系,有特征性的费城染色体
(Ph) ,既具有急性白血病细胞的特点,也具有 C M L 细胞特有的本
质。此外,其在受到不同因素的诱导时,具有向红系、单核系或巨核
细胞系分化的潜力。因此,K 56 2 细胞现已成为体外研究细胞分化和
筛选新的抗白血病药物的主要细胞模型。
最近有研究证实, 淫羊蕾昔(Icari in) 作为淫羊蕾的主要单体成
分,具有多种生物活性,可诱导 H L 一60 细胞分化,也可诱导小鼠胚胎
干细胞(emb 可onie stem eells) 向心肌细胞方向分化,且其机制与
P3 8M A P K 的激活有关。水合淫羊蕾素(Icari tin) 是从淫羊蕾提纯出的
昔, 与糖结合后经水解而成,具有抑制雌激素受体作用,分子量为
368 。本研究室的前期研究发现 Icari tin 能以浓度依赖性方式有效地抑
制 K 562 细胞增殖、诱导 K5 62 细胞凋亡,提示 Icari tin 具有抗 C M L
的作用。为进一步观察 Icari tin 的抗 C M L 效应及机制,本研究用不同
浓度 Icari tin 干预 K 56 2 细胞,观察其能否诱导 K 56 2 细胞向成熟细胞
分化,并对其分子机制进行探讨。
第一部分 Icaritin 对 K 562 细胞诱导分化作用观察
研究目的:确定 Ic丽 tin 是否能诱导 K 56 2 细胞向红系分化。方法:
用不同浓度 k ari tin (0 一 64 娜 ol/L ) 作用于 K 562 细胞 6 天,采用瑞
氏一吉姆萨染色观察细胞形态学变化、细胞内血红蛋白测定、联苯胺
染色阳性细胞计数及流式细胞术检测 K 562 细胞膜 C D 71 和 C D 2 35a
七年制硕士学位论文中文摘要
红系分化抗原表达等方法评价 Icari tin 对 K 562 细胞的诱导分化作用。
结果: 不同浓度的 Icari