白藜芦醇对3t3l1前脂肪细胞凋亡与分化影响及机制研究.pdf

中山大学
硕士学位论文
白藜芦醇对3T3-L1前脂肪细胞凋亡与分化的影响及机制研究
姓名:陈思凡
申请学位级别:硕士
专业:营养与食品卫生学
指导教师:冯翔
20100530
与分化的影响及机制研究白藜芦醇对前脂肪细胞凋亡中文摘要专业:营养与食品卫生学硕士研究生:陈思凡师:冯翔副教授中山大学公共卫生学院导随着经济的发展,人们生活水平的提高,在现代社会肥胖己成流行趋势,在大多数国家肥胖的发生率都在持续增长。肥胖发生的原因主要是由于机体摄入过多的能量,同时也缺乏体育锻炼,进而导致过多的能量以甘油三酯,男问酱⒋嬖谥鞠赴小V咀橹谌颂逯惺且桓鲋匾5哪芰课忍鹘器,脂肪蓄积过多可能导致胰岛素抵抗,这是包括吞悄虿⒏咧Vⅰ⒍粥样硬化和高血压病等代谢综合征发病的“共同土壤”。机体的脂肪含量是由脂肪细胞的体积和数目决定的。在分化成熟的脂肪细胞中,增加储存可以导致细胞体积的增大,而脂肪细胞数目的增加则是由于前脂肪细胞过度增殖及分化造成的。因此,减少机体脂肪含量的方法包括降低脂肪细胞内脂肪含量ü跋熘肪合成或脂肪分解蛞种魄爸鞠赴蛑鞠赴只虼俳爸鞠赴脂肪细胞的凋亡。传统的减肥方法主要是减少能量摄入和增加体育锻炼而降低脂肪细胞内的脂肪含量,而传统方法减肥成功者只是脂肪细胞变小而数量不变,这些方法获得的体重减轻往往难于长期持续,甚至可能出现体重反弹,因此,能否通过其它更好的途径来防治肥胖成为我们关注的焦点。中山大学硕士论文白藜芦醇对甃爸鞠赴蛲鲇敕只挠跋旒盎蒲芯
脂肪细胞起源于骨髓间充质干细胞琈,经过爸鞠赴墒熘鞠赴鸰脂解作用亡,完成整个生命周期。在脂肪细胞的生命周期中,首先形成为前脂肪细胞,前脂肪细胞经过生长抑制、克隆性增殖和一系列基因表达的变化,细胞内脂滴逐渐增加,进而形成成熟脂肪细胞。在脂肪分化过程中,过氧化物增殖体激活受体讯—~和銮孔咏岷系柏鞩/是调节脂肪形成最主要的转录因子。脂肪细胞在生命周期的后期进入凋亡阶段,细胞凋亡是维持细胞稳态和更新的程序性死亡过程。凋亡的启动和信号传导机制比较复杂,主要是通过死亡受体途径和线粒体途径。。外界因素作用于细胞信号分子,引起线粒体膜电位的改变,细胞色素头旁黾樱せ頒依赖的级联反应,从而引发细胞凋亡。在脂肪细胞的整个生命周期中,调节前脂肪细胞的分化,诱导前脂肪细胞或成熟脂肪细胞的凋亡,这对于减少脂肪细胞数目和体内脂肪储存具有重要意义。大量研究显示,植物化学活性物质对于肥胖具有防治作用。白藜芦醇,是其中一种已被广泛研究的植物化学物,广泛存在于葡萄、花生、葡萄酒和其它天然植物或果实当中,具有广泛的药理学效应。纳镅效应包括抗炎症、抗氧化、抗白血病、神经保护作用,同时可作为肿瘤化学治疗和化学预防的药物。在多种类型的肿瘤细胞中,纱俳赴芷谧柚汀⒁种细胞增殖并且诱导细胞凋亡。而且有研究发现,梢种魄爸鞠赴只中脂肪的合成,并且可促进分化成熟脂肪细胞的凋亡。然而,杂谇爸鞠胞增殖、分化及凋亡的影响及相关机制仍未明确。我们推测赡苡跋熘鞠胞生命周期各阶段,从而对肥胖及代谢综合征有预防和治疗作用。目的⒀芯坎⑻教諶对前脂肪细胞的凋亡作用及可能机制⒀芯坎⑻教諶对前脂肪细胞分化的抑制作用及可能机制中山大学硕士论文自藜芦醇对籐爸鞠赴蛲鲇敕只挠跋旒盎蒲芯
呐、,用旧ǚú舛≧对细胞增殖的影响,通过┏雎适笛槠兰跼对细胞膜的损伤作用。用旧赴核,在荧光显微镜下观察韵赴说淖饔茫谕干涞缱酉晕⒕迪鹿鄄霷对细胞凋亡超微结构的改变。用流式细胞仪测定药物作用后细胞周期、线粒体膜电位、细胞凋亡率的改变。妹庖呦赴ü馐笛槎許、进行细胞内的定位,在荧光显微镜下观察許蛋白表达的影响。用实验测定饔煤骃虲鞍椎谋泶锉浠砑酉喙匚坏、的蛱匾煨砸种萍—.——或激动剂肳法测定细胞增殖的变化,用流式细胞仪测定线粒体膜电位、细胞凋亡率的变化,用实验测定、、.前脂肪细胞的分化谩凹ξ簿啤狈椒ㄓ盏挤只一前脂肪细胞,在光学显微镜下观察细胞分化过程的形态学变化,用油红旧ū壬ǚú舛ㄏ赴只讨兄竞康变化。⒕迪鹿鄄霷对细胞分化过程中形态学的改变,用油红色比色法测定韵赴只讨竞康母谋洹实验测定饔煤笾鞠赴、/的和蛋白质表达变化,同时测定脂肪细胞因子脂联素和瘦素的表达变化。鄄霳对细胞分化过程形态学的改变,测定韵赴只脂肪含量的改变。用实验测定饔煤笾鞠赴膕尽中山大学硕士论文白藜芦醇对甃爸鞠赴蛲鲇敕只挠跋旒盎蒲芯、、、、.
肭爸鞠赴啾龋只滩煌奔涞鉙、藕虲/的检测结果与之变化趋势一致。疎鞍椎谋泶锉浠结果对前脂肪细胞的凋亡作用抑制甃爸鞠赴脑鲋常黾覮漏出率,具有时间和剂量依赖效应。经过饔煤螅赴巳旧矢叨饶踔脸鱿諨断裂