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高效液相色谱法测定邻苯二甲酸酯
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实验七 高效液相色谱(HPLC)法测定邻苯二甲酸酯
一. 实验目的
1、学****高效液相色谱仪的根本操作方法。
2、了解高效液相色谱仪原理和条件设定方法。
3、了解高效液相色谱法在日常分析中的应用。
二. 实验原理
高效液相色谱法是以液体作为流动相，借助于高压输液泵获得相对较高流速的液流以提高别离速度、并采用颗粒极细的高效固定相制成的色谱柱进展别离和分析的一种色谱方法。
在高效液相色谱中，假设采用非极性固定相，如十八烷基键合相，极性流动相，即构成反相色谱别离系统。反之，那么称为正相色谱别离系统。反相色谱系统所使用的流动相本钱较低，应用也更为广泛。
定量分析时，为便于准确测量，要求定量峰与其他峰或内标峰之间有较好的别离度。别离度〔R〕的计算公式为：
R＝ 2[t(R2)-t(R1)] /*(W1＋W2)
式中 t(R2)为相邻两峰中后一峰的保存时间； t(R1)为相邻两峰中前一峰的保存时间； W1及W2为此相邻两峰的半峰宽。 除另外有规定外，。
本实验对象为邻苯二甲酸酯，又称酞酸酯，缩写PAE，常被用作塑料增塑剂。它被普遍应用于玩具、食品包装材料、医用血袋和胶管、乙烯地板和壁纸、清洁剂、润滑油、个人护理用品，如指甲油、头发喷雾剂、香皂和洗发液等数百种产品中。 但研究说明，邻苯二甲酸酯在人体和动物体内发挥着类似雌性激素的作用，是一类内分泌干扰物。待测物性质见表1。

表1色谱柱测试条件
出峰次序
样品组成
1
邻苯二甲酸二甲酯〔DMP〕
2
邻苯二甲酸二乙酯(DEP)
3
邻苯二甲酸二丁酯(DBP)
如果要检测不同条件对谱图别离的影响，可按表1配制几种物质的混合溶液，在不同条件下进展HPLC别离检测。
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1、仪器
Agilent 1100高效液相色谱仪，50ul微量注射器。
2、试剂
甲醇〔色谱专用〕，高纯水
四. 实验步骤
1、色谱条件
色谱柱：辛烷基硅烷键合硅胶〔C8〕
柱温：室温
流动相：初始为高纯水：30％，甲醇：70％
检测器：DAD检测器;
检测波长：220nm；
进样体积：100µl定量环，实际注射每次可控制在200µl。
2、待测溶液的配制
首先用甲醇做溶剂配制储藏液：邻苯二甲酸二甲酯〔〕，邻苯二