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实验过氧化氢酶活性测定.ppt

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文档列表 文档介绍

实验过氧化氢酶活性测定
第一页，课件共10页
一实验目的
掌握和学****测定过氧化氢酶活性的原理和方法；
2 了解过氧化氢酶的作用。
第二页，课件共10页
二实验原理
过氧化氢酶（catalase）属于血红蛋白酶，含有铁，它能催化过氧化氢分解为水和分子氧，在此过程中起传递电子的作用，过氧化氢既是氧化剂又是还原剂。可根据H2O2的消耗量或O2的生成量测定该酶活力大小。
第三页，课件共10页
在反应系统中加入一定量（反应过量）的过氧化氢溶液，经酶促反应后，用标准高锰酸钾溶液（在酸性条件下）滴定多余的过氧化氢。即可求出消耗的H2O2的量。
反应式
5H2O2+2KMnO4+4H2SO4
5O2+2KHSO4+8H2O+2MnSO4
第四页，课件共10页
三实验器材
10%H2SO4；
mol/L ；
KMnO4标准液：称取KMnO4（AR），用新煮沸冷却蒸馏水配制成1000mL，草酸溶液标定；
H2O2：取30%H2O2 （），稀释至1000mL， KMnO4溶液（在酸性条件下）标定。
1　试剂
第五页，课件共10页
2　材料:小麦叶片
3　主要设备：离心机，恒温箱，酸
式滴定管
第六页，课件共10页
四方法步骤
1、酶液提取
，研磨成匀浆，转移至25ml容量瓶中，用该缓冲液冲洗研钵，并将冲洗液转至容量瓶中，用同一缓冲液定容，4000转离心15min，上清液即为过氧化氢酶的粗提液。
第七页，课件共10页
2 、滴定：取50mL三角瓶3个（2个测定，另1个为对照），，， H2O2 ，同时计时，

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