红细胞不规则抗体筛选.doc红细胞不规则抗体筛选、鉴定操作规程(凝聚***介质法)
不规则抗体检查也称红细胞抗体检查。 所谓不规则抗体是指不符合 ABO血型系Landsteine
f法则的血型抗体,也就是抗A、抗E以外的血型抗体。ABO系中的亚型,变异型抗 A 1或某种抗E等抗体, 也称为不规则抗体。 其多为 IgG 抗体。 主要是经输血或妊娠等免疫刺激产生 ,在盐水介质中不能凝集而只能
致敏相应抗原的红细胞,必须通过特殊介质(酶、抗人球蛋白、polybrene等),才能使致敏红细胞出 现凝集反应。临床上通常所称的“同型血”实际上是指 ABO 血型系统和 Rh 血型系统相同 ,其它红细胞血
型系统未必相同。 如果交叉配血不仔细 ,或者只用盐水介质配血 ,则有可能检查不出 ABO 血型系统之外的不 规则抗体 ,而此抗体与相应抗原发生免疫反应 ,可导致溶血性输血反应的发生。
红细胞血型抗体检查适用于下列情况: 1、 ABO 血型鉴定发现受检者血清中有意外抗体时; 2、供血者
血清抗体筛检; 3、输血前受者血清抗体检查; 4、输血后溶血反应疑为由同种抗体引起时; 5、孕妇血清
的抗体检查; 6、新生儿溶液血病婴儿血液中抗体检查; 7、直接抗球蛋白试验阳性红细胞上抗体的检查。
【原理】
利用筛选细胞(i、n、川)上存在的多种红细胞抗原与被检血清在凝聚***介质中反应,如果出现凝集表 示血清中存在不规则抗体。
【器材】 试管、吸管、载玻片、离心机、记号笔、显微镜 【试剂】
5%筛选细胞(i、n、川)
2.凝聚***试剂
【标本】
外周血或静脉血
【操作步骤】
1、 取试管三支,标明I、n、川并往各管加病人血清(血浆) 2滴,力口 5%筛选细胞(i、n、川)各 1 滴。
2、 各加 ,混合均匀后,再各加 Polybrene 溶液 2 滴,并混合均匀。
3、 用 BASO 专用离心机 1000G 离心力,离心 10秒,然后把上清液倒掉,不要沥干,让管底残留约 液体。
4、 轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集,如无凝集,则必须重作。
5、 最后加入 Resuspending 2 滴,轻轻转动试管混合并同时观察结果。如果凝集散开,表示是由 Polybrene
引起的非特异性聚集,抗体筛检结果为阴性;如凝集不散开,则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应,抗 体筛检结果为阳性,应进一步作抗体鉴定。
虹细胞血型抗体筛选细胞反应格局表
序
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【临床意义】
虽然不规则抗体筛选阳性率仅
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