氨基酸的薄层层析实验报告.doc

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生物化学实验报告
姓 名： **X
学 号： ******
专业年级： 临床八年制 __
组 别：第二实验室
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实验名称
(Title of Experimetn)
氨基酸的薄层层析
实验日期
(Date of Experiment)
**
实验地点(Lab No.)
第二实验室
合作者(Partner)
**X
指导教师(Instructor)
****
总分
(Total Score)
教师签名(Signature)
批改日期
(Date)
一、实验预****br/> 实验目的
掌握薄层层析法的一般原理。
掌握氨基酸薄层层析法的根本操作技术。
掌握如何根据移动速率〔Rf值〕来鉴定被别离的物质〔即氨基酸混合液〕。
实验原理
：〔是色谱分析技术的一种〕
一般是将固体吸附剂涂布在平板上形成薄层作为固定相。当液相〔展开溶剂〕在固定相上流动时，由于吸附剂对不同氨基酸的吸附力不一样，不同氨基酸在展开溶剂中的溶解度不一样，点在薄板上的混合氨基酸样品随着展开剂的移动速率也不同，因而可以彼此分开。〔即通过吸附-解吸-再吸附-再解吸的反复进展，而将样品各组分别离开来〕
. 氨基酸与茚三***的显色反响
茚三***水化后生成的水合茚三***在加热时被复原，此产物与氨基酸加热分解产生的氨结合，以及另一分子水合茚三***缩合生成蓝紫色化合物而使氨基酸斑点显色。

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层析中，物质沿溶剂运动方向迁移的距离与溶液前沿的距离之比为Rf值。
即：
=
由于物质在一定溶剂中的分配系数是一定的，故移动速率〔Rf值〕也是恒定的，因此可以根据Rf值来鉴定被别离的物质。
实验材料

①丙氨酸：称取丙氨酸溶于90%异丙醇溶液至。
②精氨酸：称取精氨酸溶于90%异丙醇溶液至。
③甘氨酸：称取甘氨酸溶于90%异丙醇溶液至。
④混合氨基酸溶液： 将丙氨酸、精氨酸、甘氨酸按等体积制成混
合溶液。〔上述溶液已由教师提前制备完成〕

①吸附剂：硅胶G(.)。
②粘合剂：羟***纤维素钠〔CMa〕：取羟***纤维素钠溶于
蒸馏水中，煮沸，静置冷却，弃沉淀，去上清备用。
③展开溶剂：按80:10:10〔V/V/V〕混合正丁醇、冰醋酸及蒸馏水，临用前
配制。
④茚三***溶液：取茚三***〔.〕溶于无水***〔.〕至。
⑤展层-显色剂：按照10:1比例〔V/V〕混合展开剂和茚三***溶液。

①层析板〔6cm15cm〕；②小烧杯；③量筒(10mL)；④小尺子；⑤毛细玻璃管；
⑥层析缸；⑦烤箱；⑧天平；⑨药匙。
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