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MACS 磁珠分选
免疫磁珠法分别细胞原理
免疫磁珠法分别细胞是鉴于细胞表面/ 6
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去除非目的细胞,在富集细胞的基础上,进行阳性分选,可获取高纯度目的细胞。
2 )多重分选策略( MultiSort Strategy )
MACS 多重分选是一种依据多种表面标记磁性分选细胞的技术。多重分选中,第一用 MACS 多项选择微珠标记目的细胞,进行第一
参数阳性分选。而后细胞与多项选择解离试剂共同孵育,后者能够将微珠从抗体上酶性解离下来。接着使用针对另一细胞表面标记
的抗体-微珠复合物磁性标记阳性分选细胞。二次标记的细胞能够再次进行阳性分选或许去除分选。
三、磁分别细胞的重要指标
纯度和得率,这取决于磁珠所连结单抗的特异性和磁珠大小(磁性),但是太大的磁珠会影响细胞活性,也没法直接上流式。
四、当前市场上有 2 种磁性细胞分别系统
1、 Small particles ( ≈ 50nm) - MACS
2、 Large particles (1200~4500 nm) - others (如 Dynal )
五、小磁珠
1、长处
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(1 )对细胞平和,不影响分别细胞的后续培育。
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(2 )可直接上流式检测,不影响散射光。
2、弊端
1 )需要很强的磁场来分别细胞。
2 )分别速度很慢,得率不高。
3 )一次性的分别柱,不可以在一般试管进行。
4 )成本昂贵。
六、大磁珠
1、长处
1 )技术简单,分别可在试管中达成。
2 )易于增减细胞用量。
3 )速度快,得率高
4 )成本低
2、弊端
1 )对细胞造成机械压力,影响其生物学活性,不利于分别后培育。
2 )纯度低。
3 )简单堵塞 FCM 的喷嘴。
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磁珠分选细胞注意事项
磁珠分选细胞注意事项
1、待分选细胞中若有贴壁细胞,建议在分选前先贴壁培育去除,或许提升 EDTA 浓度。
2、抗体包被磁珠对死细胞常
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