20134丁芬—小容量注射剂药液微生物污染水平测试及工艺时间限度确定研究报告.ppt

小容量注射剂药液微生物污染水平测试及工艺时间限度确定
2013年1月
丁芬
一、概述
二、试验目的
三、试验方案
四、试验结果及讨论
五、污染菌鉴定
六、注意事项
一、概述
在无菌药品的生产中，防止微生物污染一直是生产滤器（北京牛牛基因技术有限公司，滤器类型：NS01-75D1），将过滤器逐一插放在滤液槽座上，将其塑胶软管装入集菌仪的蠕动泵的管槽内，注意定位准确，软管走势顺畅。
三、试验方案
其进液软管的双芯针头插入供试液容器的塞上，开启集菌仪，将供试液容器倒置，使药液均匀通过滤器，滤净。打开过滤器菌面朝上贴于营养琼脂培养基和玫瑰红钠琼脂培养基平板上培养。每种培养基制备一张滤膜。细菌培养3天，霉菌、酵母菌培养5天，逐日观察菌落生长情况，点计菌落数，必要时，可适当延长培养时间至7天进行菌落计数并报告。
四、试验结果及讨论
（一）微生物污染水平检测结果见下表
四、试验结果及讨论
样品1：稀配罐内的稀配液，稀配定容后至生产结束，每隔1小时取样检测一次微生物量， 微生物量随时间变化的趋势图如下：
四、试验结果及讨论
四、试验结果及讨论
讨论：第0、1、2、3、4、5、6、7、8小时在稀配罐分别取样进行微生物限度检查，在第5小时后开始检出微生物，数量为8cfu/100ml，随时间增长微生物数量呈上升趋势。在生产即将结束时检测药液的微生物数为369cfu/100ml。
四、试验结果及讨论
根据颇尔的除菌过滤器的过滤效果的验证，理论上定容后的药液的载菌量为：×1010cfu，（除菌过滤器至少能达到107/cm2过滤面积浓度的缺陷假单胞菌， ）在除菌过滤器的除菌能力范围内。我公司工艺验证规定微生物限度检查结果应小于10cfu/ml。
我们通过检测稀配罐药液在生产过程不同时段药液的微生物数量，8小时可以作为稀配液污染控制限度的时间点。
四、试验结果及讨论
样品2：除菌过滤之前的药液，即自微生物负载滤器过滤后的药液，自灌装开始至灌装结束，每隔1小时取样检测一次微生物量，微生物量随时间变化的趋势图如下：
四、试验结果及讨论
四、试验结果及讨论
讨论：第0、1、2、3、4、5、6、7、，在第6小时后开始检出微生物，并随时间增长呈上升趋势。在生产即将结束时检测药液的微生物量为7cfu/100ml，符合除菌过滤前药液小于10cfu/100ml微生物负荷要求。
四、试验结果及讨论
我们通过检测除菌过滤前的药液在生产过程不同时段的微生物数量，8小时可以作为除菌过滤前药液污染控制限度的时间点，可以将7小时作为预留的安全时间作为内部控制时限要求。
四、试验结果及讨论
样品3：灌装后的药品，即除菌过滤后的药液，自灌装开始至灌装结束，每隔1小时取样检测一次微生物量，微生物量随时间变化的趋势图如下：
四、试验结果及讨论
四、试验结果及讨论
讨论：第0、1、2、3、4、5、6、7、8小时灌装药液分别取样进行微生物限度检查，在第7小时后开始检出微生物，并随时间增长呈上升趋势。在生产即将结束时检测药液的微生物数为50cfu/100ml，药品的载菌量为2cfu/支。符合100 cfu/100ml的灭菌前药液的微生物数量。
四、试验结果及讨论
我们通过检测灌装药液在生产过程不同时段的微生物数量，8小时可以作为灌装药液污染控制限度的时间点，可以将6小时作为预留的安全时间作为内部控制时限要求。
四、试验结果及讨论
样品4：灭菌前药液，即灭菌前放置时间最长的药液，第一锅灭菌前药液微生物数量为0，第六锅灭菌前药液微生物数量为37 cfu/100ml，符合100 cfu/100ml的灭菌前药液的微生物数量。
四、试验结果及讨论
样品5：待灭菌药液放置1小时后，取第一锅和最后一锅待灭菌时间最长的药液，灭菌程序启动后再放置一小时后检测微生物量，第一锅待灭菌放置1小时后微生物数量为3 cfu/100ml，第六锅待灭菌放置1小时后微生物数量为118 cfu/100ml，已经超过100 cfu/100ml的灭菌前药液的微生物数量。
四、试验结果及讨论
我们通过检测灭菌前药液和待灭菌药液放置1小时后的药液的微生物数量，9小时可以作为稀配至灭菌污染控制限度的时间点，可以将7小时作为预留的安全时间作为内部控制时限要求。
四、试验结果及讨论
污染控制限度的时间点和内部控制时限汇总表
四、试验结果及讨论
确定微生物污染内部控制内部时限：稀配定容至灌装结束时限为6小时，灌装开始至灭菌结束时限为7小时，每次最长待灭菌时限为3小时。
四、试验结果及讨论
（二）其他检测结果
生产当天的注射用水微生物限度检查结果0