植物组织培养实验报告.doc

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植物组织培养实验报告
摘要：以大豆子叶为外植体，在MS培养基上附加不同浓度、不同种类的植物激素，以研究不同激素组合和不同浓度对大豆子叶愈伤诱导率的影响，并练****无菌操作具的报纸，将接种工具在95%酒精中浸泡，然后用酒精灯灼烧，手不能接触接种器械的前半局部，用火灼烧镊子或手术刀要冷却前方可用于外植体的接种，防止烫伤材料，两把镊子可轮换使用；
〔2〕待接种工具冷却后，用手术刀对大豆子叶进展切割，切割时，一次取4粒大豆子叶放入小培养皿中，同方向切割完毕后选装方向，将四个方向都切下后，再在中间补一刀，不要切穿。
外植体的接种
在火焰旁翻开试管封口膜，使试管口在火焰上过一下，然后把切好的子叶放入培养基上，操作管呈倾斜状态，防止菌从口掉入，将管口再次在火焰上过一下，扎上封口膜。待所有培养试管接种完后，4个一组捆扎，放置在培养架上。
观察
〔1〕在25℃，黑暗下培养一周并观察。
〔2〕一周后，设置为25℃，光照，继续培养一周，并观察。

〔1〕一周后，观察培养试管豆子叶生情况，发现局部试管培养基呈绿色，说明该局部试管被污染；有些试管的外植体并未生长，有可能是被烫伤，也可能是生长较缓慢；少局部试管有愈伤组织出现。大概统计了一下培养试管总污染个数未
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12个，污染率15%。
〔2〕两周后，进展分组观察，结果统计如下表：
培养基编号
接种数
死亡数
死亡率
污染数
污染率
愈伤组织数
愈伤诱导率
愈伤生长状况
愈伤颜色
〔个〕
〔个〕
〔个〕
〔个〕
1
20
12
60%
5
25%
3
15%
构造较严密，生长缓慢
浅绿
20
2
6
30%
2
10%
12
60%
构造较严密，局部突起
墨绿
20
3
4
20%
5
25%
11
55%
构造疏松
墨绿
4
20
16
80%
2
10%
2
10%
构造疏松，长缓慢，
浅绿，局部为褐色


从实验结果来看，第2组即MS+6-BA〔)+NAA()和第3 组即MS+KT〔)+2,4-D() 培养基中愈伤组织诱导率较高，为较佳的愈伤组织诱导组合。其余两组的诱导率较低。得出结论，当细胞分裂素6-BA
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和生长素NAA组合时，6-BA浓度高于NAA浓度对于愈伤组织的诱导率较好；当细胞分裂素KT和生长素2,4-D组合时，KT浓度低于2,4-D浓度对于愈伤组织的诱导率较好。

结果重现性讨论
理论上第1组和第2组中细胞分裂素浓度高于生长素浓度有愈伤和生芽双重作用。第3组和第4组细胞分裂素浓度低于生长素浓度有愈伤和生根双重作用。第1组为前任推荐的对照的培养基，但由于死亡率较高，所以对照性较差。因此本次实验所得结论有建立重现性的必要。
死亡率较高的原因
〔1〕在操作中，局部