Apelin-13对3T3-L1脂肪细胞AQP7表达影响.pdf

学位论文原创性声明

本论文是我个人在导师指导下进行的工作研究及取得的研究成果。论文中
除了特别加以标注和致谢的地方外,不包含其他人或其它机构已经发表或撰
写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体,均已在论文中以明
确方式标明。本人完全意识到本声明的法律责任由本人承担。
作者签名: 日期: 年月日

学位论文使用授权声明
本人授权汕头大学保存本学位论文的电子和纸质文档,允许论文被查阅和
借阅;学校可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可
以采用影印、缩印或其它复制手段保存和汇编论文;学校可以向国家有关部
门或机构送交论文并授权其保存、借阅或上网公布本学位论文的全部或部分
内容。对于保密的论文,按照保密的有关规定和程序处理。

作者签名: 导师签名:
日期: 年月日日期: 年月日
汕头大学医学院硕士研究生学位论文
中文摘要
背景


随着社会的发展和人们生活方式的改变,目前肥胖症(obesity)在世界范围内已形成
流行趋势。肥胖与冠心病、高血压、2型糖尿病及血脂紊乱等许多代谢性疾病关系密切。
现有的减肥途径包括饮食控制、运动锻炼、减肥药物等,但现实是,患者往往难以坚持严
格的饮食控制和规律的运动,副作用多、疗效不持久等限制了减肥药的长期应用。因此,
探索一条具有远期疗效和安全性的减肥途径具有重要的现实意义。肥胖产生的关键在于能
量摄入大于消耗,剩余的能量以甘油三酯(Triglyceride,TG)蓄积的形式贮存体内,最后
导致脂肪细胞肥大和数量增多。因此,减少脂肪细胞内TG蓄积是治疗肥胖的关键所在。
研究发现,脂肪细胞内TG分解成游离脂肪酸(Free fatty acid,FFA)与甘油,甘油通
过水通道蛋白-7(Aquaporin 7,AQP7)向胞外排泄,从而减少胞内TG的合成,这为肥胖
症的防治提供了新的研究方向。我们试图从细胞脂肪因子调控的角度寻找影响脂肪细胞
AQP7基因表达的上游信号调控因子。而Apelin作为一种脂肪因子(adipocykine)与能量代
谢之间存在密切关系。在肥胖和胰岛素抵抗小鼠中,Apelin能增加骨骼肌对葡萄糖的摄取
利用、提高胰岛素敏感性、降低血浆胰岛素、甘油三酯及游离脂肪酸浓度、减小脂肪细胞
体积、减轻小鼠体重。上述研究提示:Apelin可能在肥胖症的发生、发展中发挥作用。
脂肪细胞内TG分解成FFA与甘油后,若不能及时被排至胞外代谢,将导致脂肪细胞内
TG重新合成,产生肥胖。而Apelin已证实能减小脂肪细胞内TG的含量,鉴于AQP7有助于
脂肪细胞内甘油向外排泄,减少TG合成,因此我们提出以下假说,Apelin能促进脂肪细胞
AQP7高表达,从而减少脂肪细胞内TG的蓄积,最终达到减肥效果。
本课题以成熟 3T3-L1 脂肪细胞为研究对象,用油红 O 染色鉴定,在不同浓度和时间
的 Apelin-13 作用下从转录水平检测 3T3-L1 脂肪细胞 AQP7 表达水平,从而探讨 Apelin-13
与 AQP7 表达之间的关系,为后续相关减肥机制奠定基础。
目的


探讨脂肪因子 Apelin-13 对 3T3-L1 脂肪细胞 AQP7 基因表达的剂量和时间关系。
I
汕头大学医学院硕士研究生学位论文
方法


以体外培养 3T3-L1 脂肪细胞为研究对象,油红 O 染色鉴定,分别以不同浓度(0、10-9、
10-8、10-7、10-6M)Apelin-13 组和 10-5M 罗格列酮阳性对照组干预 24h、10-7M Apelin-13
干预不同时间(0、12、24、36、48h)后,提取细胞的总 RNA,用 RT-PCR 法检测 AQP7 mRNA
表达水平。
结果


3T3-L1 脂肪细胞胞内脂滴油红 O 染色均呈红色。在浓度组中,阳性对照组与阴性对
照组之间存在显著差异(P<);与阴性对照组比较,10-8、10-7M Apelin-13 能显著刺激
AQP7mRNA 表达(P<); 10-8、10-7M Apelin-13 组与阳性对照组比较,10-7M Apelin-13
能显著刺激 AQP7mRNA 表达(P<); 10-8、10-7M Apelin-13 两组之间无统计学差异。
在时间组中, 10-7M Apelin-13 的 12、24、36h 组 AQP7mRNA 表达较 0h 组能显著刺激 AQP7
mRNA 表达( P < ),作用 24h 表达最高;但 12、24、36h 三组 AQP7mRNA 表达之间
无统计学差异。
结论