实验薄层色谱法.pptx

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实验 3 薄层色谱法
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1. 了解色谱分离的原理及其应用。
2. 初步掌握薄层色谱的操作技能。
目的和要求
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CHO < -SH- < -NH2 < -OH < -CO2H
结论：若样品极性越小，或流动相极性越大，样品
在固定相上的移动速度则越快。
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在吸附层析中，试样、洗脱剂和吸附剂三者关
系。它们三者的关系如下图。
Stahl简图
（1）离化合物的极性；
（2）吸附剂的活度；
（3）展开剂的极性。
若将这三个因素各自固定在圆周的三分之一，转动圆盘正中的三角形，如果角A指向极性物质，则角B指向活度小的吸附剂，角C就指向选用极性展开剂；A’, B’, C, 处则是合理的选择组合。
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有机化学中的应用
* 分离混合物：
一些结构类似、理化性质也相似的化合物组成的混合物，一般应用化学方法分离很困难，但应用色谱法分离，有时可得到满意的结果。
* 精制提纯化合物：
有机化合物中含有少量结构类似的杂质，不易除去，可利用色谱法分离以除去杂质，得到纯品。
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* 鉴定化合物：
在条件完全一致的情况，纯粹的化合物在薄层色谱呈现一定的移动距离，称比移值（Rf值），所以利用色谱法可以鉴定化合物的纯度或确定两种性质相似的化合物是否为同一物质。
* 跟踪一些化学反应进程：
可以利用薄层色谱或纸色谱观察原料色点的逐步消失，以证明反应完成与否。
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薄层色谱
薄层色谱又叫薄板层析，是色谱法中的一种，是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，属固-液吸附色谱，它兼备了柱色谱和纸色谱的优点，一方面适用于少量样品（几到几微克，）的分离；另一方面在制作薄层板时，把吸附层加厚加大，又可用来精制样品，此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。此外，薄层色谱法还可用来跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一种“预试”。
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一、实验步骤
薄层板的制备
展开剂的选择
点样
展开
显色
比移值
干铺法
倾注法
紫外光显色法
碘蒸气显色法
试剂显色法
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1. 制薄层板
硬板制备：50mL烧杯中放置10g硅胶GF254 ，逐渐加入5%羧***纤维素钠（CMC）水溶液7mL，调成均匀的糊状。将其涂于三片玻璃板（× cm)上，室温放置半小时后，放入烘箱中在110℃恒温半小时，即制得硬板。
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2. 点样
样品准备：
偶氮苯的纯化
样品： 1% 偶氮苯溶液；
展开剂：9:1 石油醚/乙酸乙酯
1:3 石油醚/乙酸乙酯
2. 苏丹Ⅲ的纯化
样品： 1%苏丹Ⅲ的溶液；
展开剂：9:1 石油醚/乙酸乙酯
1:3石油醚/乙酸乙酯
3. 混合样品的分离
样品： 1%偶氮苯和1%苏丹Ⅲ溶液混合样品
展开剂：9: 1石油醚/乙酸乙酯
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点样操作：
；
- mm处；
，应待前一次点
加的溶剂挥发后再进行;
，避免斑点拖尾;

小极性。
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3. 展开
选洗脱剂可利用微量圆环技术；
配制样品的溶剂具有挥发性和小极性，以免 斑点扩展,不利于分离;
,以免样品被洗脱剂扩散；
微量圆环技术
1 用环己烷展开
2 用苯展开
3 用***仿展开
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展开槽
普通展开槽
双底展开槽
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多次展开— 一次展开未达满意分离时，可将薄层板干 燥后再次用同一种溶剂展开，可重复多次，直到混合物分离为止。
梯度展开— 混合物性质差别较大时，一种流动相不