高温蛋白酶产生菌株的筛选.docx

高温蛋白酶产生菌株的筛选
高温蛋白酶产生菌株的筛选
一、实验目的
1. 学****从各种样品中分离微生物的操作技术
2. 掌握分离微生物时定性测定产物的筛选方法
3. 掌握高产蛋白酶菌株的pH ～ 121℃，灭菌20min
②酪素培养基（附录Ⅱ-）：200 mL/500 mL△×1（10-12个平板，每组6个平板）

* 酪素的母液浓度为4%，-35ml的NaOH水溶液中，水浴溶解20min，待溶解完全后加入60-70℃热水稀释到所需浓度（即定容到101 mL），即得到母液浓度围4%的酪素溶液。


各组分的母液由老师配制好，学生按照200ml的体积直接取样加入即可。
pH ～，121℃，灭菌20min，倒好平板后进行无菌检查。
③生理盐水：% NaCl水溶液，9 mL/支×10支
④其他：平皿10套、温度计、水浴锅、移液管、显微镜、涂布器2个，三角瓶（250mL， 500 mL规格）、革兰氏染色液等。
四、实验内容

学生从地表下10～15cm的土壤中用无菌小铲，纸袋取土样，并记录取样的地理位置、pH、植被情况等等。
2. 增殖培养（富集培养）
一般来讲，样品所占欲分离微生物的数量较少，利用微生物所需营养的区别，在增殖培养基中使某些微生物的
高温蛋白酶产生菌株的筛选
一、实验目的
1. 学****从各种样品中分离微生物的操作技术
2. 掌握分离微生物时定性测定产物的筛选方法
3. 掌握高产蛋白酶菌株的初筛方法
二、基本原理


从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。常用的方法有：
平板分离法：该方法操作简便，普遍用于微生物的分离与纯化。其基本原理包括两方面：
1. 选择适合于待分离微生物的生长条件，如营养、酸碱度、温度和氧等要求或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长，而抑制其他微生物生长的环境，从而淘汰一些不需要的微生物。
2. 微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个细胞繁殖而成的集合体。因此可通过挑取菌落而获得一种纯培养。获取单个菌落的方法可通过稀释涂布平板或平板划线等技术完成。值得指出的是从微生物群体中经分离生长在平板上的单个菌落并不一定保证是纯培养。因此，纯培养的确定除观察其菌落特征外，还要结合显微镜检测个体形态特征后才能确定，有些微生物的纯培养要经过一系列的分离与纯化过程和多种特征鉴定方能得到。
土壤是微生物生活的大本营，它所含微生物无论是数量还是种类都是极其丰富的。因此土壤是微生物多样性的重要场所，是发掘微生物资源的重要基地，