小鼠-缺氧实验指导(2016).doc

小鼠-缺氧实验指导(2016)
2
实验三 实验性缺氧
【实验目的】
（低张性和血液性）缺氧动物模型复制的方法，了解缺氧的分类。
（活动状况、呼吸、5%*** ml/10g； ml/10g。
(2) 腹腔注射结束后迅速将3只小鼠放入缺氧瓶中（每瓶均放置纱布包裹的钠石灰5 g），盖上胶塞；
(3) 比较观察3只小鼠的活动状况、皮肤（口唇）黏膜和呼吸频率（次数/10 s）和深度，记录小鼠出现抽搐的时间及存活时间。
表二、不同中枢状态对低张性缺氧耐受性的影响
分组
缺氧前活动状况、
呼吸、唇色
缺氧时活动状况、
呼吸、唇色
出现抽搐的时间
（s）
存活时间
（s）
尼可刹米组
***丙嗪组
生理盐水组
4. CO中毒性缺氧
（1）取草酸3 ml加入CO发生装置试管内，再加入浓硫酸2~3 ml，塞紧试管。点燃酒精灯置试管下缓慢加热可见试管内有气泡产生即可，将CO发生装置连接气囊袋收集产生的CO备用。
（2）取成年小鼠2只，分别将其放入缺氧瓶（每瓶均放置纱布包裹的钠石灰5 g）中，观察其正常表现后，用注射器从气囊袋中抽取5 ml CO注入一缺氧瓶中，并迅速盖上胶塞，另一缺氧瓶不盖胶塞。
（3）观察小鼠的活动状况、皮肤（口唇）黏膜和呼吸频率（次数/10 s）和深度，
当小鼠出现抽搐时立即取出小鼠（注意盖好胶塞）并迅速置通风处，观察小鼠各项指标是否恢复。若指标恢复，继续将小鼠放回缺氧瓶中盖上胶塞直至死亡，记录存活时间。
（4）解剖CO中毒小鼠的肝脏，观察记录其颜色变化。
2. 亚***钠中毒性缺氧
（1）取成年小鼠2只，称重，观察其正常表现后，腹腔均注射5%亚***，一只小鼠立即腹腔注射1% ml/10g， ml/10g。
（3）观察小鼠的活动状况、皮肤（口唇）黏膜和呼吸频率（次数/10 s）和深度，
4
并记录小鼠存活时间。
（4）解剖亚***盐中毒小鼠的肝脏，观察记录其颜色变化。
表三、血液性缺氧小鼠各项指标变化
分组
活动状况、呼吸、唇色
出现抽搐的时间（s）
存活时间（s）
肝脏颜色
正常对照组
CO中毒组
亚***盐中毒组
亚***盐中毒解救组
【实验注意事项】
（1）复制低张性缺氧时，要求缺氧瓶必须密闭，必要时可在瓶口涂上凡士林达到密闭效果。
（2）各组小鼠体重要求接近，体重差不得超过4 g。
（3）小鼠腹腔注射时应从左下腹斜向上进针，以免导致肝脏损伤，同时也可避免将药液注入肠管、膀胱和血管内。
（4）复制CO中毒性缺氧时CO注射量不宜过多，以免动物迅速死亡而致血液颜色变化不明显，影响结果观察。
（5）给动物注射亚甲蓝的剂量要求适当，剂量过少达不到抢救NaNO2中毒的目的；剂量过大反而会加重NaNO2的中毒作用。
（6）CO是毒性较强的气体，实验过程中要注意防护。建议实验室窗户打开通风。
【思考题】
（1）低张性缺氧时小鼠的呼吸、口