生物化学期末复习资料：生化大题.doc

生化大题汇总※参与 DNA 复制的主要酶和蛋白因子有哪些?各有什么功能? 拓扑异构酶:松解 DNA 的超螺旋。解链酶:打开 DNA 的双链。引物酶:在 DNA 复制起始处以 DNA 为模板,催化合成互补的 RNA 短片断。 DNA 聚合酶:以 DNA 为模板、 dNTP 为原料,合成互补的 DNA 新链。连接酶:连接 DNA 片断。 DNA 结合蛋白:结合在打开的 DNA 单链上,稳定单链。※ DNA 复制有何主要特点? 半保留复制,半不连续合成、需 RNA 引物,以 dNTP (A,T,C,G )为原料,新链合成方向总是 5’->3 ’, 依赖 DNA 的 DNA 聚合酶( DDDP ) ※ DNA 复制的高保真性主要取决于哪些因素? DNA 复制的高保真性取决于三个方面: 1、 DNA 双链碱基的严格配对与 DNA 聚合酶对配对碱基的严格选择性; 2、5’->3 ’外切核酸酶的即时校读作用; 3 、对 DNA 分子中的错误或损伤的修复机制。※真核生物 DNA 复制在何处进行?如何进行? 在细胞核内。复制分为以下几个阶段:1、起始阶段( DNA 解旋解链及引物合成): DNa 拓扑异构酶、解链酶分别使 DN A 解旋、解链, 形成复制叉, 在起始点由引物酶催化合成 RNA 引物;2、 DNA 合成阶段:以 DNA 的两条链分别作为模板, dNTP 为原料按碱基互补原则( A-T , C-G )在 RNa 引物引导下,由 DNA 聚合酶催化合成 DNA 新链( 分前导链和随从链);3、终止阶段: 水解 RNa 引物( polI ), 填补空缺( polI ), 连接 DNA 片断( 连接酶)。※何谓反转录?在哪些情况下发生反转录?写出主要酶促反应过程。以 RNA 为模板在反转录酶的作用下合成 DNA 的过程叫做反转录。反转录可发生于: 1 、在 RNA 病毒感染宿主细胞甚至致癌过程中; 2 、在基因工程中,以 mRNA 为模板合成 cDNA 。病毒 RNA (反转录酶 dNTP )- >RNA-DNA 杂化链( RNA 酶活性)- >cDNA 单链( DNA 聚合酶活性)- >cDNA 双链※概述 DNA 的生物合成。 DNA 的生物合成包括 DNA 半保留复制, DNA 损伤后的修复合成和反转录 DNA 复制是以 DNa 的两条链分别作为模板,以 dNTP 为原料,在 DNA 聚合酶作用下按照碱基配对原则合成互补新链, 这样形成的两个子代 DNA 分子与原来 DNa 分子完全相同, 一条链来自亲代, 另一条链是新合成的,故称为半保留复制。在某些梨花、生物学因素作用下 DNa 链发生碱基突变、缺失、交联或链的断裂等损伤后,可进行修复。修复方式有光修复、切除修复、重组修复与 SOS 修复等。切除修复: 1 、核酸内切酶从损伤处的 5’端切开,出现正常的 3’端;2、核酸外切酶水解已打开的损伤 DNA 段; 3DNA 聚合酶以互补的 DNA 链为模板, dNTP 为原料, 5’->3 ’方向合成新的 DNa 片段; 4 、连接酶连接形成完整的 DNA 链。以 RNA 为模板在反转录酶的作用下合成 DNA 的过程叫做反转录。反转录在病毒致癌过程中起重要作用; 在基因工程中可用于以 mRNA 为模板合成 cDNA 的实验。※催化磷酸二酯键形成的酶有哪些?比较各自不同特点。有 DNA 聚合酶、 RNA 聚合酶、引物酶、反转录酶、连接酶和拓扑异构酶。酶反应时限底物反应结果 DNA 聚合酶 DNA 复制或修复合成模板 DNA 、引物、 dNTP 合成互补 DNA 新链 RNA 聚合酶转录或 RNA 复制 DNA/RNA 模板、 NTP 合成 RNA 新链引物酶复制起始阶段起始点 DNA 模板、 NTP 合成 RNA 引物反转录酶反转录 RNA 模板、 dNTP 合成互补 DNA 连接酶 DNa 复制或修复合成双链 DNA 中相邻片段合成 DNA 长链拓扑异构酶 DNA 复制起始超螺旋 DNA 解旋 DNA 复制后松弛态 DNA 重新形成螺旋※比较复制与转录的异同模板均为 DNA ,都需要聚合酶催化反应,聚合过程都是在核苷酸之间形成 3’,5’- 磷酸二酯键,合成方向都是5’->3 ’,都遵从碱基配对规则。不同点包括:复制使子代保留亲代的全部遗传信息,方式为半保留不连续复制;转录只是按照生存的需要表达部分遗传信息,方式为不对称转录。聚合酶分别是 DNApol 和 RNApol ,原料分别是 dNTP 和 NTP ,碱基配对 RNA 将 A->T 改为 A->U ,复制产物分别为 DNA 和 RNA 。※何谓不对称转录?用实验证明之在双链 DNA 中只有一股单链作为模板;另外在同一条单链上可以交错出现模板链或编码链。用核酸杂交方法:用热变性将