RPHPLC法测定穿心莲提取物中穿心莲内酯的含量.doc

1 RP 拟 HPLC 法测定穿心莲提取物中穿心莲内酯的含量【摘要】目的建立穿心莲提取物中穿心莲内酯的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法,色谱柱: Hypersil ODS C18 ( mm × 250 mm ,5μm) ,流动相:乙***拟体积分数 %磷酸水溶液( 体积比 25∶ 75), 检测波长 226 nm ,流速 mL/min 。结果穿心莲内酯在 ~ μg ( r= ) 范围内线性关系良好, 平均加样回收率为 %, RSD 为 %。结论本方法简便、准确、重现性好, 可作为穿心莲提取物中穿心莲内酯的含量测定方法。【关键词】反相高效液相色谱法; 穿心莲提取物; 穿心莲内酯穿心莲内酯( andrographolide ) 又名穿心莲乙素, 是爵床科植物穿心莲 Andrographis paniculata ( . ) Nees 的有效成分之一,具有抗菌、消炎、止咳平喘、清热解毒、凉血消肿等作用, 广泛用于上呼吸道、消化道的细菌感染所引 2 起的各种疾病[1]。关于穿心莲药材及其制剂中穿心莲内酯的含量分析测定方法已有比色法、薄层扫描法、高效液相色谱法等报道[ 2-5 ]。本文采用反相高效液相色谱法( RP 拟 HPLC )测定了穿心莲提取物中穿心莲内酯的含量,方法简便、快速、准确, 可作为穿心莲提取物中穿心莲内酯的含量测定方法。 1 仪器与试剂美国安捷伦科技有限公司生产 HP1100 高效液相色谱仪, G1311A 四元泵, G1314A 紫外检测器, HP1100/Agilen t 化学工作站, Lambda25 型紫外分光光度计(带扫描功能), 德国赛多利斯 BP211 D型电子天平(感量 mg ), SB220 0 超声波清洗器,针筒式样品过滤器,溶剂过滤器。甲醇(分析纯, μm 滤膜滤过) ; 乙***(色谱纯) ; 水( 重蒸水); 穿心莲提取物: 桂林莱茵生物制品有限公司提供; 穿心莲内酯对照品: 中国药品生物制品检定所提供,批号: 0797 — 200106 。 2 方法与结果 3 检测波长的选择对穿心莲对照品溶液进行最大吸收的波长扫描,记录色谱图(图 1) ,穿心莲内酯的最大吸收波长在 226 nm 处, 故选择此波长为穿心莲内酯的检测波长。图1 穿心莲内酯吸收光谱图(略) UV spectrogram of andrographolide 色谱条件色谱柱为 Hypersil ODS C18( mm × 250 mm,5 μ m) ,柱温为室温, 流动相为乙***拟体积分数 % 磷酸水溶液( 体积比 25∶ 75), 流速 mL/min , 进样量 5μL, 检测波长 226 nm 。 标准曲线的制定精密称取穿心莲内酯对照品 10mg置 10mL 容量瓶中, 加甲醇超声溶解后定容至刻度,得质量浓度为 mg/mL 的对照品溶液,过 μm 滤膜。精密吸取穿心莲对照品溶液 、 、 、 、 、 、 mL 分别置 10 mL 容量瓶 4 中, 加甲醇稀释至刻度。按上述色谱条件进行分析, 每次进样5μL, 以对照品穿