羊口疮病毒的分离鉴定及其ELISA检测方法的建立.pdf

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∥\;《徇嘶氘昀砗独创性声明关于论文使用授权的声明年多月沙,辏露嗳沙,/年本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。导师签名:时间:日●,‘
厂————————————————————————————————————————————————————————一~~彳孙\\蘑爱荡妻岛\\搬力一复方中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表预防兽医学培养单位芯克专业论文题目羊口疮病毒的分离鉴定及其觳夥椒ǖ慕论文作者张海瑞研究方向指导教师才学鹏兰州兽医研究所硕姓名职称单位签名导师动物疫苗与分军事医学科学院十一研究员博导口所副研究中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中国农业科学院兰州罗建勋兽医研究所吴润教授甘肃农业大学殷宏答硕导口曾巧英辩委会议记录厥论文答辩时问地点子免疫学评王兴龙阅人刘明员主席景志忠贝/、口一
摘要羊口疮又称羊接触传染性脓疱性皮炎,是由羊口疮病毒引起的绵羊、山羊和某些野生反刍动物的一种常见的接触性、嗜上皮性传染病,该病毒也可感染人。羊口疮病毒属于痘病毒科副痘病毒属,该属病毒还包括牛丘疹性炎病毒、假牛痘病毒以及红鹿、松鼠、海豹副痘病毒。羊口疮呈世界性分布,近年来发病率逐年上升,引起人们广泛关注。羊口疮病毒基因组由双链线状槌桑笤嗦个假定基因;其中羊口疮病毒虮嗦朐是具有高免疫原性的主要囊膜蛋白,该蛋白与牛痘病毒主要囊抗原同源。人们已根据保守的蚪醒蚩诖《镜募觳猓肿犹卣髅枋龊徒鞣治觥随着羊口疮流行范围的日益扩大,亟需建立统一标准的诊断方法,对羊口疮的流行状况进行评估,进而为防控羊口疮提供技术支撑。基于此,本实验进行了如下研究:蚩诖《靖仕嘀甑姆掷胗爰利用细胞从甘肃某地发病绵羊痂皮病例中分离羊口疮病毒;根据羊口疮病毒基因序列,《臼羝渌稍苯卸嘈蛄比对,最大似然法构建系统发育进化树。结果表明:接种羊口疮病毒的细胞在接种后内产生细胞病变硐治O赴奂⑷诤稀⒃菜酰敝镣崖涞奶卣餍圆”洌挥蒙杓频奶匾性引物对病毒基因组蠵扩增,电泳显示扩增出约的清晰条带,与目的基因片段长度一致;与参考序列相似性为%,提交获得登录号;系统发育进化树表明分离的羊口疮病毒属于В胙蚩诖《炯A址掷胫昵自倒叵到R陨辖峁得鞒晒Ψ掷氲羊疮病毒,将其命名为株。蚩诖《綛重组蛋白的原核表达及纯化在大肠杆菌中成功表达了刈榈鞍祝⒍訲ǘ取⒂盏际奔浜臀度等诱导条件进行优化,最终确定温度℃、浓度/⒂盏急泶狟融合蛋白的最佳诱导表达条件;由于该蛋白以包涵体的形式表达,采用蚐对包涵体进行处理,,该融合蛋白具有良好的免疫反应原性。蚩诖疎检测方法的建立选用重组鞍鬃魑0豢乖剿髦刈榈鞍鬃魑U锒峡乖⒓浣覧检测方法的一系列条件。通过方阵试验,确定了抗原最佳包被浓度/孑G宓淖罴严∈投任:J笛橹实该觳夥椒ǖ奶匾煨浴⒚舾行浴⒅馗葱跃虾谩关键词:羊口疮病毒;分离鉴定;辉吮泶铮幻噶C庖呶绞匝一
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目录第一章羊口疮研究进展及展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..病原学和分类学地位⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..基因组学⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯流行病学特征⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯临床症状⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯抗病毒机制和免疫逃避⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..诊断方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...±.《〖!.凳倍縋⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...拗菩云纬ざ榷嗵苑治觥总结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第二章羊口疮病毒