肝素质量控制及新型酶法制备低分子量肝素研究.pdf

谨以此文献给我的母校,我的导师,我的父母,以及我的亲人朋友们
■一,
肝素质量控制及新型酶法制备低分子量肝素研究撸琭学位论文完成日期:指导教师签字:答辩委员会成员签字:
户%
导师签字:推﹐§緄弘敝触半嚣签字日期:つ挛H导师签字:~传叩琽学位论文版权使用授权书孙胡独创声明叮坏娉蹦顾恐匾9冶鹬泵思奎拦亘窒蚱渌逃沟难换蛑な槭本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含未获得用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本学位论文作者完全了解学校有关保留、‘使用学位论文的规定,并同意以下事项:⒀S腥ūA舨⑾蚬矣泄夭棵呕蚧顾徒宦畚牡母从〖痛排蹋市论文被查阅和借阅。⒀?梢越宦畚牡娜ú炕虿糠帜谌荼嗳胗泄厥菘饨屑焖鳎梢采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权清华大学“中国学术期刊馀贪电子杂志社’’用于出版和编入《中国知识资源总库》,授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ作位学日签者年文川期字整。●●,琂●’
肝素质量控制及新型酶法制备低分子量肝素研究摘要肝素和硫酸乙酰肝素是由糖醛酸.—一被咸烟堑闹馗炊堑ピW成的线性多糖。组成肝素和硫酸乙酰肝素的二糖结构单元有Ⅳ.硫酸基、蛩基以及Ⅳ阴;榷嘀盅苌峁梗庑┙峁沟ピT谔橇粗械牧铀承蚯П渫蚧因而形成了极其复杂的糖链一级结构。肝素在年被发现并于年开始在临床上作为抗凝剂使用至今。肝素是仅次于胰岛素的使用最广泛的天然药物。我国是肝素原料药生产大国,产量占世界总产量的一半以上。年上半年在美国发生的肝素钠污染事件导致一百多人死亡,这个事故重新引起了人们对肝素结构研究和质量控制的重视。本论文分四个章节,分别从肝素的结构、肝素酶的性质、肝素酶对肝素的降解以及新型低分子量肝素的制备等四个方面来阐述肝素及肝素酶的特点和性质。肝素的结构非常复杂,目前还不能直接对肝素这样大的复杂多糖分子直接进行研究。本课题通过将肝素降解成分子量从蟮牟煌橇闯ざ鹊母嗡毓烟堑形式来研究肝素的结构和序列,并讨论了肝素酶诮到飧嗡厥彼硐值南喙匦对于肝素酶的研究已经很多。本论文在前人研究的基础上,继续对肝素酶的选择性和降解的类型进行深入仔细地研究。大部分的实验结果与已经报道的相同或者相近。研究还发现,肝素酶透嗡孛显示出对底物相同的降解类型,均为底物依赖性的以外切方式为主的降解酶。除此以外,还发现了肝素酶碌难择性降解的特点,即对某一种糖苷键的选择性降解跟糖苷键在糖链中的位置有本论文的工作重点之一是应用三种肝素酶降解植煌丛吹囊┯酶嗡夭品并用自制的肝素寡糖标准品对这些降解的肝素寡糖混合物进行定性和定量的’研究,比较了各个肝素样品之间在酶解以后的区别,定性定量地分析了肝素寡糖的成分。用酶法降解肝素并对寡糖进行成分分析的方法为肝素质量控制的新方法,可以用来检测肝素的结构和部分的序列。质。关。
以多种不同结构和分子链长度的肝素寡糖为底物,对肝素酶降解的选择性和水解类型进行了深入地研究,发现肝素酶坏ǹ梢圆糠纸到飧嗡爻傻头肿恿扛素,而且不会破坏肝素分子中抗凝血活性所必须的五糖结构片段。采用肝素酶制备出一种新型的低分子量肝素,并比较了其与已有的低分子量肝素的分子量和抗凝血活性。本论文的最后还简要地讨论了对肝素等这样复杂的多糖物质研究的作用和意义,以及对肝素研究的发展趋势的简单介绍。关键词:肝素肝素酶肝素寡糖图谱低分子量肝素Ⅱ
甌甌.,.弋猤..,,.琣,⒁詔瓵闕Ⅲ
: