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,
年月

人参皂苷对离体大鼠胸主动脉平滑肌的作用及作用机制研究
Rg2
任煜,刘婷婷,祁冰洁,祝凌丽
(安庆医药高等专科学校科研中心实验室,安徽安庆)
246052
摘要:目的:研究人参皂苷()对离体大鼠胸主动脉平滑肌的作用,并且对其作用
Rg2GRg2
机制进行初步探讨。方法:采用离体血管环技术制备离体大鼠胸主动脉环模型,采用血管收缩率为考察
指标,设置内皮完整组和内皮去除组,记录人参皂苷()对去甲肾上腺素()预收缩大鼠
Rg2GRg2NE
胸主动脉环张力的变化影响。分别以、、预孵育内皮完整血管环后,考察
LNAMEODQIndomethacin
人参皂苷()对去甲肾上腺素()预收缩血管环的舒张作用;加入-3/的人参皂
Rg2GRg2NE10molL
苷孵育去内皮血管后,用不同浓度的、、收缩血管,观察血管的舒张作用。结果:
2
Rg2NEKClCaCl
与空白对照比较,-5、-4、-3、-2/的人参皂苷()能显著提高经预收缩的
10101010molLRg2GRg2NE
内皮完整的血管环的舒张率(),且呈浓度依赖趋势;经、、预
P<
孵育内皮完整血管后,不同浓度的人参皂苷()能显著增加、预孵育后内
Rg2GRg2LNAMEODQ
皮完整的血管环的舒张率();对预孵育内皮完整血管舒张率无显著影响();
P<>
经-3/人参皂苷()预孵育去内皮血管后,不同浓度的去甲肾上腺素()与空白
10molLRg2GRg2NE
对照组相比,没有显著性差异()。经-3/人参皂苷()预孵育去内皮血管
P>
后,不同浓度的、与空白对照组相比,均具有显著性差异()。结论:人参皂苷
KClCaCl2P<
()具有良好的舒张血管作用并且呈内皮依赖性,其机制可能与内皮依赖性环氧化酶途径和抑
GRg2
制电压依赖性钙离子通道的开放所导致的细胞外钙的内流有关。
关键词:人参皂苷;离体血管;钙通道
Rg2
中图分类号:文献标识码:文章编号:()
R285A1671380X202203002007
EffectandMechanismofGinsenosideRgonIsolatedRatThoracicAortaSmoothMuscle
2
RENYu,LIUTingting,QIBingjie,ZHULingli
ResearchCenterLaboratoryAnqingMedicalCollegeAnqingChina
(,,246052,)
AbstractObjective
::ToinvestigatetheeffectandmechanismofginsenosideRg2(GRG2)onisolatedratthoracic
Methods
aortasmoothmuscle.:
(GRG2)onthetensionofthoracica-

werepreincubatedwithLname,ODQandIndomethacin,respectively,andthediastoliceffectofginsenoside
Rg2(GRG2)onthevascularringspreconstrictedbynorepinephrine(NE)-
-3
selswereincubatedwith10mol/LginsenosideRg2,andthevesselswereconstrictedwithdifferentconcentrationsof
Results
2
NE,KClandCaCltoobservethevasodilation.:Comparedwiththecontrolgroup,ginsenosideRg2(G
-5-4-3-2
RG2)at10,10,10,10mol/Lsignificantlyincreasedthediastolicrateofnepreconstrictedintactvascular
rings(P<)
Lname,ODQandIndomethacin,differentconcentrationsofginsenosideRg2(GRG2)significantlyincreased
thediastulationrateofintactendothelialvascularringsafterLNAMEandODQpreincubation(P<).There
收稿日期:
20210806
基金项目:安庆医药高等专科学校自然科学研究项目编号
(:2020ZR007)。
作者简介:任煜女安徽安庆人讲师硕士研究方向为药理学
(1987),,,,,。
·20·
第期任煜刘婷婷祁冰洁等人参皂苷对离体大鼠胸主动脉平滑肌的作用及作用机制研究第卷
3,,,:Rg244
wasinsignificanteffectonendothelialintactvasodilationrateofIndompreincubation(P>).Afterpreincu-
-3
bationwith10mol/LginsenosideRg2(GRG2)toremoveendothelialvessels,therewasnosignificantdifference
betweendifferentconcentrationsofnorepinephrine(NE)andthecontrolgroup(P>).Afterpreincubation
-3
2
with10mol/LginsenosideRg2(GRG2)toremoveendothelialvessels,differentconcentrationsofKClandCaCl
Conclusion
hadsignificantdifferencescomparedwiththeblankcontrolgroup(P<).:GinsenosideRg2(G
RG2)-
theliumdependentcycooxidasepathwayandtheinhibitionofextracellularcalciuminfluxcausedbyvoltagedepend-
entcalciumchannelopening.
Keywords
:ginsenosideRg2;invitrobloodvessel;calciumchannel
高血压是恶性心脑血管事件的主要危险因素之试液的为本课题组临用时自制
K-H:NaCl118
一脑卒中心肌梗死心力衰竭及慢性肾脏病是其
3
,、、mmol/L,,NaHCO25mmol/L,
主要并发症严重威胁人类的身体健康是医学界重
2442
,,,,CaCl
点的课题之一降压药物调节血压的途径有多种包纯水配制后
。,,d-glucose10mmol/L,,
括影响交感神经影响肾素血管紧张素系统再充分通和的混和气体后用
,(RAS),95%O25%CO2,PH
调节钙通道改善血管内皮功能影响血液流变学计测值并滴定至
,,,PH,。
改变心脏血流动力学抑制血管重构利尿降压等[1]实验仪器
,,。
临床治疗高血压的药物很多但这些药物的靶点比较生物记录软件澳大
,MaclabAID(ADInstrument,
单一都有其副作用因此发现安全有效的抗高血利亚组织器官灌流系统
,,,);Radnoti(ADInstrument,
压药物具有重要意义澳大利亚
。)。
人参是我国传统名贵中药材对人体健康具有很实验动物
,
重要的作用人参中含有很多的生理活性物质其中大鼠雄性体重清洁级由
。,Wistar,,250-300g,,
人参皂苷是迄今为止研究最多的活性物质其中人参中国医学科学院放射医学研究所实验动物中心提供
,,
皂苷具有抗心肌缺血改善失血性休克血流动力批号京
Rg2、:SCXK200F()0004。
学调节血压改善脑缺血的作用[2-4]近年来越来2方法
、、。,
越多的学者研究人参皂苷对心血管系统的影响大鼠胸主动脉环的制备
Rg2。
研究表明人参皂苷对于自发性高血压大鼠的有降压作将大鼠端头处死后迅速打开胸腔分离胸主动脉
,,
用[5]但人参皂苷具有舒张血管环的作用尚未见立即投入预冷的氧饱和
。Rg24℃Kreb-Henseleit(K-H)
报道因此本研究采用离体血管环灌流方法考察液中小心分离周围组织后剪成长的血管
。,,,,3-4mm
人参皂苷对离体大鼠胸主动脉平滑肌的舒张作用环将处理好的动脉环置于含液的恒温浴
Rg2。K-H37℃
并探讨其作用机制为筛选治疗心血管疾病治疗的天槽中一端固定于浴槽底部另一端连接张力换能
,,,
然药物提供实验基础器固定后调整动脉环张力至并不断通入
。,,
1材料和的混合气体用生
95%O25%CO2。PowerLab/8P
药品与试剂物信号记录系统分析记录血管的等张收缩力平衡
,15
人参皂苷成都曼思特生物有限公分钟更换液后将张力维持在的血管环
Rg2(G-Rg2,。K-H,
司去甲肾上腺素美国公司产品批的张力上调稳定重复换液并将张力
);(NE,Sigma,,15min;
号乙酰胆碱美国公司继续上调直至达到血管环最佳静息张力
:103K0979);(ACH,,,
产品批号二***亚砜在该条件下稳定进行后续实验首先加入
,:BCBC9786V);(DMSO,90min,。KCl
美国公司产品批号左旋硝溶液终浓度为至浴槽达到最大幅度后
Sigma,:SHBC2107V);(60mmol/L),
基精氨酸甲酯美国公司产品批换液加入试液平衡到稳定
(L-NAME,Sigma,,K-H,,15min。
号恶草灵并血管环内皮完整性的检测
:BCBF4375V),1H-[1,2,4][4,3-a]
喹喔啉***美国公司产品批号采用去甲肾上腺素终浓度为-6
-1-(ODQ,Sigma,:(NE,10mol/L)
吲哚美辛美国公刺激血管环使其张力上升至最大幅度而后加入
060M4102);(Indomethacin,Sigma,,
司产品批号***化钾国产分终浓度为-5计算该血管环的舒张
,:030M1660V);(KCl,ACH(10mol/L),
析纯***化钙国产分析纯幅度选择舒张幅度大于和小于的血管环
);(CaCl2,)。,60%10%
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第期宜春学院学报第卷
344
进行后续预刺激收缩实验-7-6的去甲肾上腺素
。mol/L、3×10mol/L、10mol/L
去内皮胸主动脉环的制备来收缩血管作为空白对照然后换液平衡
(NE),,,
取血管环用玻璃棒轻轻碾压血管以除去血管血管将血管稳定在加入终浓度为-3
,,,,10mol/L
内皮加入溶液终浓度为-6至浴槽的孵育血管用上述浓度的再次来
。NE(10mol/L),Rg2,20min,NE
使血管环收缩待血管张力稳定后加入溶液收缩血管描记张力曲线分别测定各给药组血管环
;,Ach,。
终浓度为-5使血管舒张若血管环舒张张力并计算起舒张率试验重复次记录并比较
(10mol/L)。。10,
幅度小于最大收缩幅度的则可认为内皮去除完不同时间点各组的血管环舒张率
5%,。。
全可用于后续试验人参皂苷对所致的去内皮的
,。(G-Rg2)KCl
累积浓度人参皂苷对内皮完整的离体胸主动脉收缩反应的影响
(G-Rg2)
离体胸主动脉的作用将去内皮的血管平衡在平衡待稳
,15min,
采用刺激稳定后的离体血管环使其稳定在定后先加入累积浓度分别为
NE,、15mmol/L、
最大收缩幅度加入不同累积浓度的人参皂苷的来收缩血管作为空
,Rg230mmol/L、60mmol/LKCl,
终浓度均为-5-4-3-2对白对照然后换液平衡血管将血管稳定在
(G-Rg210、10、10、10mol/L),,,,,
应给药时间点分别记为给药点用加入-3的孵育血管用上述浓
1、2、3、4。K-H10mol/LRg2,20min,
营养液代替溶液外其余操作步骤相同作为空度的再次来收缩血管分别测定各给药组血管环
Rg2,,KCl,
白对照组采用肌张力换能器分别在给药点张力并计算起舒张率试验重复次记录并比较
。1、2、3、。10,
上测定给药组与空白组的血管环张力计算其舒张不同时间点各组的血管环舒张率
4,。
率舒张率加入后血管环舒张幅度人参皂苷对所致的去内皮
:(%)=G-Rg2/(G-Rg2)CaCl2
诱发血管环的最大收缩幅度试验重复的离体胸主动脉收缩反应的影响
NE×100%。10
次记录并比较不同时间点各组的血管环舒张率将去内皮的血管平衡在平衡待
,。,15min,
累积浓度的人参皂苷对去内皮的离体胸主稳定后在高钾试液中加入空白溶液孵育血
,Krebs,
动脉的作用管加入溶液使其终浓度分别为-3
2
20min,CaCl,10
将血管内皮除去后按照的方法描记血管--2-
,,mol/L、10mol/L、10mol/L、10mol/L,
环张力曲线并比较相同药物浓度对内皮完整与除去空白对照组然后换液将血管平衡到平衡
,,,,
内皮的血管的舒缩活动的异同换液次加入浓度为-3的
。15min,3,10mol/LRg2,
人参皂苷对合酶抑制剂孵育血管加入上述浓度的再次来收缩
(G-Rg2)NO(L-20min,CaCl2
鸟苷酸环化酶抑制剂环氧化酶抑血管分别测定各给药组血管环张力并计算起舒张
NAME)、(ODQ)、,
制剂吲哚美辛预孵育的内皮完整的率试验重复次记录并比较不同时间点各组的
(Indomethacin)。10,
离体胸主动脉的影响血管环舒张率
。
取项下内皮完整的血管环分别将合酶3统计学处理
,NO
抑制剂终浓度为鸟苷酸环实验数据以均值标准差表示采用
L-NAME()、±,
化酶抑制剂终浓度为吲哚美软件处理两组间均数比较作检验多组间均数比较
ODQ()、t,
辛终浓度为加入组作方差分析采用单因素方差分析两组
(Indomethacin)()(ANOVA),
织浴槽使之作用于稳定后的内皮完整的血管环孵育间比较采用独立样本检验表示差异显著
,t。P<,
后刺激血管收缩当其稳定在最大幅度为差异极显著
20min,NE,P<。
后加入不同累积浓度的人参皂苷终浓4结果
,Rg2(G-Rg2
度均为-5-4-3-2描记张力曲线累积浓度的人参皂苷对于内皮完
10、10、10、10mol/L),。(G-Rg2)
用营养液代替溶液外其余操作步骤相同整及去内皮的离体胸主动脉的舒张作用
K-HRg2,,
作为空白对照组再按项下方法分别测定各给药在内皮完整的情况下人参皂苷终
。,Rg2(G-Rg2,
组血管环张力并计算起舒张率试验重复次记浓度均为-5-4-3-2均能够降低血
。10,10、10、10、10mol/L)
录并比较不同时间点各组的血管环舒张率管环张力与刺激下的最大张力比较差异显著
。,NE,
人参皂苷对所致的去内皮的P并且具有剂量依赖关系但对于除去内皮
(G-Rg2)NE(<)。。
离体胸主动脉收缩反应的影响的血管环不同累积浓度的人参皂苷未
,Rg2(G-Rg2)
将去内皮的血管平衡在平衡待能影响其张力与空白对照组比较无明显差异P
,15min,,(>
稳定后先加入累积浓度分别为-8-7表明不同浓度人参皂苷对内皮
3×10mol/L、)。Rg2(G-Rg2)
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第期任煜刘婷婷祁冰洁等人参皂苷对离体大鼠胸主动脉平滑肌的作用及作用机制研究第卷
3,,,:Rg244
完整离体胸主动脉环有明显舒张作用对去内皮的离对血管的舒张作用呈内皮依赖性结果见表
,。1。
体胸主动脉无明显作用说明人参皂苷
,Rg2(G-Rg2)
表1人参皂苷Rg2对内皮完整与去内皮血管环张力的影响(x±s,=10)
n
()
Table1EffectofginsenosideRg2GRG2onthetensionofendotheliumintactand
xs
deendothelium-removedvascularrings,comparedwiththeblankcontrolgroup(±,n=10)
剂量血管环张力收缩率
药物(%)
空白对照组内皮完整组去除内皮组
(mol/L)+GRg2+GRg2
-5*
±±±
-4**
±±±
-3**
±±±
-2**
±±±
与空白对照组比较:*P,**P。
<<
人参皂苷对合酶抑制剂组比较明显减弱差异显著P并
(G-Rg2)NO(L-NAME,(<),
预孵育的内皮完整的离体胸主动脉的影响且人参皂苷对去内皮血管无明显舒张作用表明
NAME)Rg2。
人参皂苷终浓度均为-5-4人参皂苷的血管舒张作用可能通过内皮依赖的
Rg2(G-Rg2,10、10、Rg2
-3-2能够对内皮完整且采用预途径来实现的结果见表
10、10mol/L)L-NAMENO-cGMP。2。
孵育的血管环的舒张作用仍然存在但与未加
,L-
表2人参皂苷Rg2对L-NAME干预条件下血管环舒缩活动的影响(x±s,=10)
n
Table2EffectofginsenosideRg2onthevasomotoractivityofvascular
xs
ringunderLNAMEinterventioncondition(±,n=10)
剂量血管环张力收缩率
药物(%)
去内皮组内皮完整组内皮完整组
(mol/L)+L-NAME
-5△*△
±±±
-4△△**△
±±±
-3△△**△△
±±±
-2△△**△△
±±±
与内皮完整组比较,*P,**P,与去内皮组比较,△P,△△P。
<<<<
人参皂苷对鸟苷酸环化酶抑制剂比较明显减弱差异显著P并且对去内皮
(G-Rg2),(<),
预孵育的内皮完整的离体胸主动脉的影响血管无明显舒张作用进一步说明人参皂苷的血
(ODQ)。Rg2
人参皂苷终浓度均为-5-4管舒张作用可能通过内皮依赖的途径来实现的
Rg2(G-Rg2,10、10、NO。
-3-2能够对内皮完整且采用预孵结果见表
10、10mol/L)ODQ3。
育的血管环的舒张作用仍然存在但与未加组
,ODQ
表3人参皂苷Rg2对ODQ干预条件下血管环舒缩活动的影响(x±s,=10)
n
Table3TheeffectofginsenosideRg2onthevasomotoractivityofvascular
xs
ringundertheinterventionconditionofODQ(±,n=10)
剂量血管环张力收缩率
药物(%)
去除内皮组内皮完整组内皮完整组
(mol/L)+ODQ
-5△*
±±±
-4△△**△
±±±
-3△△**△
±±±
-2△△**△△
±±±
与内皮完整组组间比较,*P,**P,与去内皮组比较,△P,△△P。
<<<<
人参皂苷对环氧化酶抑制剂吲哚孵育的血管环的舒张作用与未加组比较无显著
(G-Rg2)Indom
美辛预孵育的内皮完整的离体胸主差异并且对去内皮血管无明显舒张作
(Indomethacin)(P>),
动脉的影响用表明人参皂苷的血管舒张作用可能不是通过
。Rg2
人参皂苷终浓度均为-5-4内皮依赖的途径来实现的结果见表
Rg2(G-Rg2,10、10、PGI2。4。
-3-2对内皮完整并且采用组预
10、10mol/L),Indom
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表4人参皂苷Rg2对Indom干预条件下血管环舒缩活动的影响(x±s,=10)
n
Table4TheeffectofginsenosideRg2onthevasomotoractivityof
xs
vascularringundertheinterventionconditionofIndom(±,n=10)
剂量血管环张力收缩率
药物(%)
去除内皮组内皮完整组内皮完整组
(mol/L)+ODQ
-5
±±±
-4**△△△△
±±±
-3**△△*△△
±±±
-2**△△△△
±±±
与内皮完整组比较,*P,**P,与去内皮组比较,△P,△△P。
<<<<
人参皂苷对所致的离体胸主度为-3的人参皂苷孵育后
(G-Rg2)NE10mol/LRg2(GRg2),
动脉环收缩反应的影响不同浓度的与空白对照组相比在浓度为
KCl,KCl
去除血管内皮用累积浓度分别为-8和上显著性差异
,3×10mol/L、15mmol/L30mmol/L(P<)。
-7-7-6的去甲肾上腺表明人参皂苷可能抑制电压依赖性钙
10mol/L、3×10mol/L、10mol/LRg2(GRg2)
素刺激血管收缩作为空白对照组用终浓度离子通道抑制细胞外钙进入血管平滑肌细胞结果
(NE)。,。
为-3的人参皂苷孵育去内见表
10mol/LRg2(GRg2),6。
皮的血管不同浓度的去甲肾上腺素与人参皂苷对所致的离体
20min,(NE)(GRg2)CaCl2
空白对照组相比没有显著性差异表明胸主动脉环收缩反应的影响
,(P>)。
人参皂苷的血管舒张作用可能不是通去除血管内皮在无钙的试液中用不同
Rg2(GRg2),K-H,
过抑制受体依赖性的钙通道来实现的结果见表浓度的***化钙刺激血管收缩作为空白对照组用终浓
。5。。
表5人参皂苷2对所致的大鼠的离体胸度为-3的人参皂苷孵育去内
RNE
g10mol/LRg2(GRg2)
主动脉收缩的收缩率的影响(,x±s,=10)皮的血管用终浓度为人参皂苷
%n
20min,Rg2(G
-3的孵育后不同浓度的
Table5EffectofinsenosideR2onthecontractionrateof
gg)/,2
xsRg210molLRg2CaCl
NEinducedthoracicaortainvitro(%,±,n=10)与空白对照组相比人参皂苷在
,()
浓度空白对照组人参皂苷Rg2GRg2
NE浓度为-3--2-
组CaCl210、10、10、10mol/L
(mol/L)(control)Rg2现显著性差异P进一步表明人参皂苷
-8*(<)。
3*±±
-7(),
±±
-7制细胞外钙进入血管平滑肌细胞结果见表
3*±±。7。
-6表7人参皂苷2对2以所致离体胸主动脉的
±
血管环收缩的收缩率的作用(,,)
与空白对照组比较,*P。x±s=10
<%n
人参皂苷对所致的离体胸主
Table7EffectofginsenosideRg2onthecontraction
(G-Rg2)KCl
动脉环收缩反应的影响
rateofannulusconstrictionofisolatedthoracic
xs
表6人参皂苷2对所致离体胸主动脉的血aortainducedbyCaCl2(%,±,n=10)
RgKCl
管环收缩的收缩率的作用(,,)浓度空白对照组人参皂苷
x±s=10CaCl2
%n组
(mol/L)(control)Rg1
Table6EffectofginsenosideRg2onthecontractionrateof-3**
±±
KClinducedthoracicaortainvitro(%,±,n=10)-**
±±
KCl-2**
±±
(mmol/L)(control)Rg2-*
±
±±
与空白对照组比较,*P,**P。
**<<
±±
**5
±±
*舒张血管的作用与血管内皮细胞和血管平滑肌细
±
与空白对照组比较,*P,**P胞有关[6]去甲肾上腺素能够选择性的激活血
<<.。(NE)
去除血管内皮用不同浓度的***化钾刺激血管收管平滑肌上的受体开放受体操纵性钙通道
1
,α,
缩作为空白对照组用终浓度为-3的人参皂细胞内钙离子增加使血管收缩[7]能够激
,1