成都地区HBV基因型分布分析及准种筛查.pdf

四川大学硕士学位论文作者生娈竖二七年四月学校代码:学号:
爹碰≯。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得四川大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本学位论文成果是本人在四川大学读书期间在导师指导下取得的论文成果归四川大学所有,特此声明。申请人:指导教师:
成都地区蛐头植佳芯考白贾稚覆研究生:卢亦路导师:夏庆杰副研究员摘要目的:乙型肝炎是一种流行范围广、危害程度大的世界性传染病。我国是此病的高发区,乙肝携带者占到国民总数陨希啡鲜兑腋尾毒咄槐洹⒍嘌切偷囊糯熘市裕苑⒉』蒲芯亢土俅膊《诊疗均有重大意义。基于其广泛存在的准种现象,本实验拟采用长片段高保真聚合酶链反应甈椒ǎ猿啥嫉厍鳫基因型分布试码区特异引物,对例已确诊的粜愿腥菊哐G辶呀馕锝高保真┰觥2捎盟蜒趿茨┒酥罩狗法庑蚣际醵运获得锝胁庑颍徊庑蚪峁隚曜夹蛄斜榷苑中停分析其准种特征。同时,采用文献中常用的型特异引物分型法作为标准对照,通过使用、只蛐偷奶匾煲镒榻谐彩絇扩增结果:蛑苯硬庑蚍ḿ觳獬啥嫉厍巳篐基因分型结果为:作调查。方法:设计合成蜃榧渫葱越细叩谋砻婵乖鞍编检验,比较两种方法的分型结果以评估其可靠性和准确性。因型例%型例%珼型%醇渌四川大学硕士学位论文
混合型%2庑蚪峁允玖薍基因组中存在高度变异性的遗传特征,不仅同一基因型内广泛存在多态性和异质性,有些患者体内的《局暌惨远嗫寺〉淖贾中问酱嬖凇结论:基因分型结果表明成都地区攀苹蛐鸵訠型为主,次之,偶见汀U庥胛南妆ǖ牢夜戏街饕A餍谢蛐臀狟型一致。对乙型肝炎患者血清病毒的测序图进一步分析表明,扩增产物并非序列完全一致的单一克隆,而是一个以优势株为主的相关突变株病毒群贾。蛑苯硬庑蚍芄蛔既返丶ǔ鱿喙赝槐渲瓴《救褐的优势株基因型。因而与型特异引物分型法相比,排除了非优势突变株产生的假阳性干扰,更好地反映出了虻亩嗫寺∽贾痔卣鳎私果差异具有统计学显著性意义.。实验结果证实了咄槐易重组及存在准种现象的遗传学特征,其遗传异质性,特别是一些重要多态位点的进化意义以及对于乙肝诊疗、预后的影响尚有待进一步研究。关键词:乙型肝炎病毒;基因型;长片段高保真聚合酶链反应;直接测序法;型特异引物分型法;准种基因型和混合型;基因型特异引物分型法检测结果为:.,.,例.,疌混合型例%珺/四川大学硕士学位论文
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前言展中国家广为流行。我国是乙型肝炎感染的高发地区,《颈砻婵乖携带者即多达亿,约占全世界的三分之一。乙型肝炎是由乙型肝炎病毒染所致,主要的病变为肝细胞变性坏死及肝脏间质炎性浸润。通常大多,若病程迁延达六个月以上则转为慢性乙型肝据世界卫生组织报道,全球约有亿人曾感染过渲新携带者超过亿人,约%集中在亚洲地区。每年约有蛉怂烙腥舅碌母嗡ソ摺⒏斡不驮⑿愿蜗赴【俊=鑫夜年即有约万人死于与乙型肝炎有关的慢性肝病伟┯敫斡不【俊《驹诟卧嘀写罅糠敝车贾赂窝祝⒖山徊椒⒄刮V刂⒏窝住⒏硬化甚至原发性肝细胞癌,目前仍无特效疗法。乙型病毒性肝炎的流行严重地影响国民的健康水平,并制约着社会和经济的发展,对我国人民健康构成了严重威胁。即使普及了乙肝疫苗接种,但现有乙肝患者及乙肝病毒携带者的传染及预后治疗仍然是严重问题。乙肝病毒在人群中主要通过血和血制品、母婴、破损的皮肤和黏膜及性接触传播,其中母婴传播特别是围产期传播为我国腥镜闹饕模式。乙肝病毒感染高发病区为岁,低发病区为辏桓腥韭饰婴幼儿时期感染⒄刮B砸倚透窝椎目赡芊直鹗浅赡昶诟腥镜乙型病毒性肝炎是一种世界性的传染病,特别是在亚洲、非洲等发数受感染者自发痊愈或成为无明显症状的慢性病毒携带者炎,或发展为肝硬化和肝癌。明显性别间差异,但男性病情迁延及发展为肝癌的概率均较女性为高【俊影响乙型肝炎病情慢性化发展的最主要因素是感染年龄,若在围产期和四川大学硕士学位论文
乙肝病毒为带包膜的《荆羰雀尾《究啤5缇迪鹿鄄斓降拇直径约。颗粒表面由外膜蛋白幢砻婵乖琀槌桑的MǔQV蠨帕Eǘ纫约毙愿窝浊狈诤笃谖W罡撸诩病起始后则迅速下降。病毒侵入肝细胞后可于细胞核内观察到游离的核衣壳,囊膜则以小球状或管状颗粒的形式残留在细胞外。《厩秩敫蜗赴笫紫韧讶ヒ驴牵统鯤胂赴内,以负链D0逖映ず托薏拐矗纬晒布郾蘸匣纷碊除此之外,片段最长的前基因组咕哂凶魑2《灸孀B几粗模板的功能。在病毒复制过程中,多聚酶结合于前基因组司ヒ换方峁梗纬蒖/多聚酶复合物