外源基因表达及其优化策略.pptx

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生命科学学院
本章重点掌握内容
基因表达的关键要素及要求
影响外源基因表达的因素
表达产物的纯化
甲醇酵母表达系统
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生命科学学院
第一节 影响外源基因表达的因素
基因表达:
从DNA分子有序地将其所承载的遗传信息,通过密码子和反密码子系统,转变由特定氨基酸顺序构成的多肽或蛋白质分子过程,从而决定生物有机体遗传表型。
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基因表达是指结构基因在生物体中的转录、翻译以及所有加工过程。
基因工程中基因高效表达研究是指外源基因在某种细胞中的表达活动,即剪切下外源基因片段,拼接到另一个基因表达体系中,使其能获得原生物活性又可高产的表达产物。
生命科学学院
第一节 影响外源基因表达的因素
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生命科学学院
第一节 影响外源基因表达的因素
基因表达
遗传信息从DNA到蛋白质的传递过程——中心法则(centraldogma)。
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生命科学学院
第一节 影响外源基因表达的因素
克隆基因的表达
外源基因在宿主细胞中表达
外源基因
表达载体
重组载体
导入宿主细胞
在宿主细胞中
表达出蛋白质
提取蛋白
宿主细胞:
原核细胞或真核细胞
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生命科学学院
第一节 影响外源基因表达的因素
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生命科学学院
第一节 影响外源基因表达的因素
影响外源基因表达的因素主要有:
阅读框架
顺式作用元件
翻译过程
表达体系
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生命科学学院
第一节 影响外源基因表达的因素
一、阅读框架对转化基因的影响
什么是阅读框架(openreadingframe,ORF)?
二、顺式作用元件对基因表达的影响

1)启动子
2)增强子
3)沉默子
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生命科学学院
第一节 影响外源基因表达的因素
二、顺式作用元件对基因表达的影响

1)终止子
2)衰减子

1)核基质结合区
2)绝缘子
3)基因座控制区
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