氟苯尼考残留检测ELISA试剂盒说明书.doc

***苯尼考残留检测ELISA试剂盒说明书
青海民泽龙羊峡生态水殖有限公司
***苯尼考(Florfenicol)ELISA检测试剂盒说明书
一、原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在微孔条上预包被偶联抗原,样本中的残留物***苯尼考和微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗***苯尼考抗体,加入酶标记物后,用TMB底物显色,样本吸光值与其所含残留物***苯尼考的含量成负相关,与标准曲线比较可得出相应残留物***苯尼考的含量。
二、试剂盒技术指标交叉反应率
***苯尼考…………………100% ***苯尼考***…………………% 甲砜霉素…………………< 1% ***霉素…………………< %
三、试剂盒组成
1、微量测试孔:每条8孔,一板12条
2、标准液X6瓶:(1ml/瓶)0ppb、、、、
、
3、酶标记物…………………12ml 4、抗体浓缩液…………………7ml 5、底物 A液…………………7ml 6、底物 B液…………………7ml 7、终止液…………………7ml 8、 20X浓缩洗涤液…………………40ml 9、 2X浓缩复溶液…………………50ml
四、所用仪器、试剂
具备的仪器:微孔板酶标仪、氮气吹干装置、均质器、
振荡器、离心机、刻度移液管、天平( )
微量移液器:单道 20μl-200μl、100μl-1000μl、多道
250μl
试剂:乙酸乙酯、正己烷。
五、样本前处理步骤
样本处理前须知
处理任何样本时,都必须注意:
(a)实验中必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂
时要更换吸头。
(b)实验之前须检查各种实验器具是否干净,必要时
可对实验器具进行清洁,以避免污染,干扰实验结果。
样本前处理需配制:
配液1:将2X浓缩复溶液用去离子水按1:1稀释。(1
份浓缩复溶液+1份去离子水,用于样本提取后的复溶)
(a)组织(鸡肉/肝、猪肉/肝、虾、鱼等)前处理
方法
1、用均质器均质组织样本;
2、称3±,加入6ml乙酸乙酯,振
荡5min,室温4000r/min以上,离心10min; 3、取出2ml上层液体在50-60℃下氮气/空气吹干或旋转
蒸发仪蒸干
4、加入1 ml正己烷溶解干燥的残留物,再加1ml稀释后
的复溶液强烈振荡30s,室温4000r/min以上离心15min。
5、取50 μl下层相用于分析。
样本稀释倍数:1
(b)蜂蜜
1、取2± g蜂蜜,放入离心管中,用4ml 2、去离子水溶解;
3、加入4ml乙酸乙酯上下振荡5min; 4、室温4000r/min以上离心10min;
5、移取1ml上层乙酸乙酯()到另一离
心管中,50-60℃氮气流下干燥;
6、,混合30s; 7、取50 μl用于分析。
8、样本稀释倍数:1 检测下限: 9、定量下限:
六、酶标免疫分析程序测定前应须知:
青海民泽龙羊峡生态水殖有限公司
1、使用之前将所有试剂和需用板条的温度回升至室温
(20-2