血清葡萄糖浓度的测定(0002).pptx

血清葡萄糖浓度的测定(GOD-POD法)
第二组:艾红安赵可吴永健龚文
实验目的
1、掌握血糖变化的临床意义。
2、掌握酶法测定血清葡萄糖浓度的原理。
生理性高血糖可见于摄入高塘食物后,或情绪紧张肾上腺分泌增加时。
生理性低血糖见于饥饿和剧烈运动时。
临床意义
低血糖< 高血糖(空腹)>
临床意义
病理性高血糖
糖尿病:胰岛素绝对或相对不足的糖尿病患者。
内分泌腺功能障碍:引起各种对抗胰岛素的激素分泌过多,或升高血糖的激素
增多引起的高血糖。(胰岛素是唯一降低血糖的激素)
颅内压增高:可刺激血糖中枢,引起血糖增高。如脑膜炎、颅外伤、颅内出血等。
脱水引起的高血塘:如呕吐、腹泻和高热等也可使血糖轻度增高。
病理性低血糖
特发性功能性低血糖最多见,其次是药源性、***性和胰岛素瘤等。
实验原理——酶法分析
偶联酶反应定量法:
A
B
C
酶1
酶2
使用此方法条件:当单酶反应的底物或产物用物理化学手段不能区分时

(即:当测定 A 或 B 很困难时,可用酶2作为指示酶,通过测定 C 的
含量来间接测定 A 的含量)
实验原理——酶法分析
以 H2O2酶作指示酶系统:(本次实验使用方法)
某底物
H2O2
显色
过氧化物酶
底物相应酶
H2O2氧化色素原
吸光度
过氧化物酶的底物有两类:
1. 单一色素原:邻联茴香***、二氨基联苯***、四***联苯***等
2. 成对色素原:苯酚与4-氨基安替比林本次实验所使用的
两种色素原同时存在
以脱氢酶作指示酶系统: (略)
实验原理
葡萄糖
苯酚
O2
葡萄糖氧化酶(GOD)
葡萄糖酸
H2O
红色醌类化合物
4-氨基安替比林
过氧化物酶(POD)
H2O2氧化色素原
2 H2O2
操作步骤
试剂/mL
空白管
标准管
测定管
血清
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葡萄糖标准液
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蒸馏水

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酶酚混合试剂



先取3支试管,然后按表格操作
混匀,置于37℃水浴中,保温25min,在波长510nm处比色,
以空白管调零,读取标准管及测定管的吸管度
计算公式
血清葡萄糖浓度
=
A 测定
A 标准
X
5 mmol/L
葡萄糖标准液 5 mmol/L
参考值:
空腹血清葡萄糖浓度: ~ mmol/L