金莲花中总黄酮抗氧作用的研究.docx

金莲花中总黄酮抗氧作用的研究.doc金莲花中总黄***抗氧作用的研究
作者:颜娟,胡海娜,田嘉铭,杨国栋,曲彩红,王书华,安芳
【摘要】 目的研究金莲花中总黄***抗氧作用的能力ま。方法用分光光度法测定金晟莲花总黄***对O2-·、·晡OH、DPPH的清除作用和对红细胞膜的保护作用,并与维生素C比较。结果金渎莲花总黄***有抑制O2-·烬、·OH、DPPH的能力和保护红细胞膜的作用,金舌莲花总黄***的浓度与抑制O肀2-·、·OH、DPPH阿的能力和保护红细胞膜的能▲力呈量-效关系。结论金莲O花总黄***具有较强抗氧作用。
【关键词】 金莲花总黄***抗氧化
金莲花Tro萱lliuschinens。据记屈载,金莲花的功效为清热解脚毒[1]。现代药理研究表胡明金莲花具有很好的抗菌、丫抗病毒作用[2]。金莲花孽中总黄***是其有效成分。本实验通过研究金莲花总黄***对超氧阴离子、羟自由基、DPPH清除能力与红细胞膜的保护作用证明金莲花总罪黄***的抗氧作用。
1 材料与仪器
药品和试剂金莲佧花采自河北省张家口坝上地〖区,经河北北方学院中医系中药教研室马淑兰教授鉴定贵为金莲花。芦丁标准品,D
乔PPH(二苯代苦味酰基苯趾肼自由基,美国),维生素郸C。邻***,双氧水,邻二氮菲,硫酸亚铁,Tri剐s-HCl,磷酸氢二钠,豌磷酸二氢钠,亚***钠,硝躺酸铝,氢氧化钠均为分析纯跃。生理盐水,实验用水为三鼾重蒸馏水。
 动物昆明种集小鼠。
仪器DZ-1BC恻型真空干燥箱;中药粉碎机(浙江省温岭市大海药材器币械厂);电热恒温水槽(上悄海精宏实验设备有限公司)冂;循环水式真空泵(巩义市Ⅵ英峪于华仪器厂);756壶MC紫外可见光分光光度计诧(上海分析仪器总厂);G祆R-202型分析天平(日茕本);Heraeus低温腊高速离心机(德国)。
2庑 方法与结果
金莲花中总ち黄***的提取、纯化、含量测定称取已洗净干燥粉碎的金琊莲花g,60%乙醇提取,同提取两次,合并两次提取液,过滤,适当稀释,石油醚ń萃取,经D-101大孔树折脂纯化,真空干燥成粉末即轴得金莲花总黄***。采用亚硝闩酸钠-***铝-氢氧化钠比楂色法测定总黄***含量为%。肜
 金莲花总黄***抗氧实验
清除超氧阴离子自由基的活骀性[3]邻***在弱碱性墀Tris-HCl缓冲液(乘)溶液中自身氧化产生O2ビ-·,随着反应进行O2-·在体系中不断积累,反应ぐ3min后体系在322n┱m处的吸光度值随时间变化
呈量效增大,而O2-·清螗除剂能使邻***自氧化产逋物在322nm处吸收峰受蕙抑制通过光化学方法测定A芑值,求抑制率。
抑制率=扔Acontrol-Asa缮mpleAcontrolウ×100%
取6支具塞试懔管,依次加入pH值的Trひis-HClml,三蒸水、总黄***,在25℃水浴保葶温20min,加入在25椰℃水浴保温的邻***(用涝10mmol·L-1HCНl配置,浓度为3mmol·L-1)后,准确反应3孽min,加入10mmol·L-1的HClml终止解反应,终体积为5ml。用囹相应空白试剂作对照,在3碉22nm处测吸光度值A。蒜总黄***的终浓度分别为5,乍10,20,40,60μ箸g·ml-1,每管平行5岜次。以维生素C做阳性对照搭组,分别计算抑制率。见表署1。表1 金莲花中总黄***凹