金莲花中总黄酮抗氧作用的研究.doc

金莲花中总黄酮抗氧作用的研究.doc金莲花中总黄***抗氧作用的研究
作者:颜娟,胡海娜,田嘉铭,杨国栋,曲彩红,王书华,安芳
【摘要】目的研究金莲花中总黄***抗氧作用的能力。方法用分光光度法测定金莲花总黄***对O2-·、·OH、DPPH的清除作用和对红细胞膜的保护作用,并与维生素 C比较。结果金莲花总黄***有抑制O2-·、·OH、DPPH的能力和保护红细胞膜的作用,金莲花总黄***的浓度与抑制O2-·、·OH、DPPH的能力和保护红细胞膜的能力呈量-效关系。结论金莲花总黄***具有较强抗氧作用。
【关键词】金莲花总黄***抗氧化
金莲花Trollius chinensis 。据记载,金莲花的功效为清热解毒[1]。现代药理研究表明金莲花具有很好的抗菌、抗病毒作用[2]。金莲花中总黄***是其有效成分。本实验通过研究金莲花总黄***对超氧阴离子、羟自由基、DPPH清除能力与红细胞膜的保护作用证明金莲花总黄***的抗氧作用。
1 材料与仪器
药品和试剂金莲花采自河北省张家口坝上地区,经河北北方学院中医系中药教研室马淑兰教授鉴定为金莲花。芦丁标准品( 中国生物制品药品检定所),DPPH (二苯代苦味酰基苯肼自由基,美国),维生素C(中国生物制品药品检定所)。邻***,双氧水,邻二氮菲,硫酸亚铁,Tris-HCl,磷酸氢二钠,磷酸二氢钠,亚***钠,***铝,氢氧化钠均为分析纯。生理盐水,实验用水为三重蒸馏水。
动物昆明种小鼠(由学校动物中心提供)。
仪器DZ-1BC型真空干燥箱(天津市泰斯特仪器有限责任公司);中药粉碎机(浙江省温岭市大海药材器械厂);电热恒温水槽(上海精宏实验设备有限公司);循环水式真空泵(巩义市英峪于华仪器厂);756MC紫外可见光分光光度计(上海分析仪器总厂);GR-202型分析天平(1/10万)(日本);Heraeus低温高速离心机(德国)。
2 方法与结果
金莲花中总黄***的提取、纯化、 g,60%乙醇提取,提取两次,合并两次提取液,过滤,适当稀释,石油醚萃取,经D-101大孔树脂纯化,真空干燥成粉末即得金莲花总黄***。采用亚***钠-***铝-氢氧化钠比色法测定总黄***%。
金莲花总黄***抗氧实验
清除超氧阴离子自由基(O2-·)的活性[3]邻***在弱碱性Tris-HCl 缓冲液()溶液中自身氧化产生O2-·,随着反应进行O2-·在体系中不断积累,反应3 min后体系在322 nm 处的吸光度值随时间变化呈量效增大,而O2-
·清除剂能使邻***自氧化产物在322 nm处吸收峰受抑制通过光化学方法测定A值,求抑制率。
抑制率(%)=Acontrol-AsampleAcontrol×100%

取6支具塞试管,-HCl ml,三蒸水、总黄***,在25℃水浴保温20 min,加入在25℃水浴保温的邻***(用10 mmol·L-1HCl 配置,浓度为3 mmol·L-1)后,准确反应3 min,加入10 mmol·L-1 的HCl ml终止反应,终体积为5 ml。用相应空白试剂作对照,在322 nm处测吸光度值A。总黄***的终浓度分别为 5,10,20