γ-氨基丁酸对Hela细胞端粒酶活性影响的研究.pdf.pdf

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论�著��������������������盔固�
�一氨基丁酸对����细胞端粒酶活性影响的研究�
李宝坤�
�辽宁中医药大学基础医学院生物化学教研室辽宁沈阳��������
【摘要】目的探讨�一氨基丁酸������对�����细胞端粒酶活性的影响。方法用不同浓度�一氨基丁酸作用于体外培养的����细�
胞,用自动电泳凝胶成像分析仪进行结果分析。结果�����/��的����作用���时,�����胞的端粒酶活性降低最显著。结论�����
对����细胞端粒酶活性起下调作用,其下调作用可能与其抑制肿瘤细胞增殖、恶化有关。�
【关键词】�一氨基丁酸����������细胞�端粒酶�
�中图分类号】��������文献标识码】���文章编号】�����—���������������~����—���
实验证明抑制端粒酶活性可以抑制肿瘤细胞生长。������胞�人��.�、�蛋白含量测定��Ⅱ』�酚法测定端粒酶提取液蛋白质含量。�
宫颈癌细胞�,具有很高的端粒酶活性,为研究�粒酶的常用细胞。��、�、�端粒重复扩增法������结合电泳及银染法测定端粒酶�
�一氨基丁酸������通过其�型受体抑制大鼠胃癌的生长,这种作用�活性:①端粒重复序列扩增:����反应体系包含��×���缓冲液�
与它抑制胃窦黏膜细胞的增殖有关⋯。����在很多方面有益于人����,����混合物���,�������聚合酶����,��引物���,�
体,如降血压、治疗癫痫病等。如能在抑制肿瘤细胞生长中发挥作�端粒酶提取液���据�����酚法测得蛋白质浓度计算加液量�,���,�补�
用,将为肿瘤治疗提供新途径。本实验研究通过观察����细胞端粒�足到����,混匀后干���保温�����合成端粒酶延伸产物后加入���
酶的活性在不同浓度的����作用时的变化,探������与肿瘤细胞�引物���,�������。然后进行��次循环扩增。②���产物纯化:�
端粒酶的关系。�酚、氯仿:异戊醇法。后加入�.�倍体积��.�%乙醇,一���放置���
�材料与方法���,������/���离心�����;留沉淀,加入����������及���电�
�.�一般资料�冰示踪液备用。③电泳:取上述提纯物���加入�����×����—�
����细胞,中国医科大学实验中心二部冻存。��������,��.�%聚丙烯酰胺凝胶进行电泳分离,����,�.��。④硝酸�
试剂:�一氨基丁酸、胎牛血清,���������、青霉素、庆大露�银染色:取下凝胶,置��%冰乙酸,��℃固定�����;去离子水漂洗��
素、�����、胰蛋白酶、�~�����粉、������、���和������华美�次,共计�����;置�.�%硝酸银染液巾,���染色�����;再用去离子�
公司�、���试剂盒�日本������公司�、���������/��������������水漂洗�次,共计����;用含�.��%甲醛和�.�����/�碳酸钠显影液�
均购干华美生物工程公司��引物��一��������������显影,直至产物信号足够强而背景不至于过高为止。⑤结果分析:用自�
���������与��引物�