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黑木耳菌种制种技术简介
用试管制成斜面培养基,并接种原始试管种(保留种,
并用于生产的母种即为生产母种,可用于扩接原种)

配方一综合马铃薯培养基

维生素B110毫克琼脂20克水1000毫升 PH值自然
配方二合成培养基
马铃薯20克葡萄糖20克磷酸二氢钾2克蛋白胨10克


先将马铃薯洗净去皮切成簿片,称取200克,加水1000毫升,煮沸15—20分钟,
用4层纱布过滤,取其滤液并补足水至1000毫升,加入琼脂20克,再加热,琼
脂溶化后,再加入其它配方中的药品。
培养基的分装,应在培养凝固前进行(琼脂培养基40℃凝固)一般用漏斗,或
分装瓶,下端连接一段软橡皮管,橡皮管下面再连接一水段玻璃管,在橡皮管安
装一个止水弹簧夹,分装时将玻璃管细口插入试管内,但不要碰到管壁,每支管
装入量为度管长度1/4。装好后塞上棉塞,每10支试管扎一捆,棉塞上用塑料纸封扎好,用线绳捆扎起来。
  将分装后的试管扎捆好,放入高压蒸气灭菌锅,在1公斤/厘米压力下(锅
入温度达121℃)灭菌20分钟,使微生物包括芽子色全部杀死。待压力降到0度时,
慢慢放出锅内气体,趁培养基没有凝固时,将试管摆成斜面。
   通过无菌操作方法将菌种接入试管斜面上,置28℃、3天后将温度
降至24℃继续培养,12—15天左右,菌丝长满整个试管斜面,即成(生产)母种。
原种的制作
母种接种到原种培养基上,进行扩大繁殖育种即为原种,原种一般采用广口瓶或袋
装。

配方一 木屑麸皮培养基
阔树木 78% 麸皮 20% 糖 1% 石膏粉 1% 水 65% PH值 自然
配方二 棉籽壳木屑混合培养基
棉籽壳 90% 糖 1% 麸皮 5% 过磷酸钙 3% 石膏粉 1% PH值 自然

选用新鲜无霉变原料,根据生产所需的数量,计算配料总量,将麸皮、石膏粉均匀
的混合在培养料里,糖和过磷酸钙溶于水解后,按上述干料量加入水,比例为1:1、
3拌匀,培养料含水量60%为宜,含水量以手紧握培养料指缝间有水欲滴为宜。堆
闷30分钟后,装瓶(袋)。用机械或人工装袋稍加压实。(塑料袋规格通常为9*21*0、
04即,而袋宽9厘米,长21厘米,单层厚4厘米)实,在袋口外套入塑料环,形
成象瓶子一样,然后在袋口内塞松紧适宜棉塞、或用牛皮纸包扎好。

原种灭菌方法有两种,高压灭菌和常压灭菌。高压灭菌又称加压蒸气灭菌,灭菌原
理:在高温(120℃)、高压(1公斤/厘米2)条件下灭菌2-3小时,将芽孢在内的
微生物全部杀死。常压灭菌称流通蒸气灭菌,由于灭菌设备、条件和基本因素的不
同,温度变动在90-103℃之间,其热力、穿透力不强,在一定温度下维持足够时
间达到灭菌目的,通常在100℃下维持8-10小时。
 
不论用接种箱或接种室接种,在接种前,需对接种箱或接种室用0、2%的来苏水或
漂白粉进行消毒处理,然后将灭菌过的料瓶(袋)放入接种箱内或接种室内,用紫
外线灯照射30分钟后,在无菌条件下进行接种,或在接种前用烟雾剂密