生化实验VC测定实验报告.docx

实验报告
课程名称:生化实验B 实验日期:
班级姓名学号:
维生素C定量测定
2,6-二***酚靛酚法
背景及目的
抗坏血酸(维生素C)是活性很强的物质,在机体内起着抗氧化剂的作用,并维护血管、肌肉、骨骼、牙齿的正常生理功能,激活抗体的形成,白细胞的吞噬,抑制细菌的毒性,增大机体的抗病能力,增强大脑中氧的含量,激发大脑对氧的利用,促进生血机能,帮助铁的吸收,叶酸的利用。王敏群,刘清,孙丽枫《蔬菜中抗坏血酸含量分析》,中国卫生检验杂志2006年7月第16卷第7期
近年来已报道的测定维生素C(VC)含量的方法众多,遗憾的是一般的方法灵敏度低、仪器复杂、操作烦琐。据查资料得知现在普遍采用光度法、荧光法、色谱法、电化学分析法等实验方法,实验结果比较准确。马正,《VC 药片中抗坏血酸含量的测定及比较》,科技创新导报,2008年第四期
但限于实验室条件及教学要求,本次实验采用
2,6-二***酚靛酚法来测定桔皮和桔肉的VC含量。
要求学****定量测定维生素C的原理和方法;掌握微量滴定法的基本操作技术;了解蔬菜水果中维生素C的含量。
实验原理
维生素C又叫抗坏血酸,是一种水溶性维生素。在所有维生素中,维生素C是最不稳定的。在贮藏,加工和烹调时,容易被破坏。它还易被氧化和分解。百度百科, VC ,http://baike./view/
维生素C属于水溶性维生素,分布广泛,其化学本质为不饱和的己糖内酯化合物,有L型和D型两种异构体,只有L型有生理作用。新鲜的水果和蔬菜中含有丰富的VC,如橙子、西红柿、猕猴桃、辣椒等尤为丰富。植物中含有抗坏血酸氧化酶,能将VC氧化为二***古洛糖酸而失去活性,所以贮存久的蔬菜水果中含量会大量减少。
如果人缺少维生素C将会患坏血病,如皮肤损伤及血管变脆等引起的牙龈出血等。
维生素C具有很强的还原性。它可分为还原性和脱氢型,还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二***酚靛酚(DCPIP),本身则氧化为脱氢型抗坏血酸。在酸性溶液中,2,6-二***酚靛酚呈红色,还原后变为无色。一旦溶液中的维生素C已全部被氧化时,则滴下的染料立即使溶液变成粉红色。所以,当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化,此时即为滴定终点。根据染料消耗量即可计算出样品中还原型抗坏血酸的含量。
仪器与试剂、材料
1、仪器
⑴离心机
⑵托盘天平(含砝码)、托盘天平(平衡离心管用)
⑶移液枪⑷容量瓶(100ml)一个⑸玻璃棒⑹烧杯(50ml)3个⑺吸管一个⑻研钵⑼三角瓶3个⑽微量滴定管一个
2、试剂
⑴ 2%草酸溶液
⑵标准抗坏血酸溶液()取抗坏血酸50mg溶于2%草酸稀释至250ml,冰箱保存。
⑶ 2,6-二***酚靛酚钠溶液: ()
称取干燥的2,6-二***酚靛酚钠60mg,加蒸馏水100-150ml,滴加
NaOH 4-5滴,放入200ml容量瓶中,强烈震摇十分钟,冷却后加水至刻度,摇匀后用滤纸过滤于棕色瓶中,贮于冰箱中备用。
3、材料
桔子(用桔皮及桔肉)
操作步骤
用托盘天平称取桔肉10g,先称取然后去掉膜,放在研钵中,加少量石英砂研磨成匀浆。(另一组同学称取2g桔皮做研磨,同一个桔子)用2%草酸溶液将匀浆洗入离心管,实际用草酸溶液40ml左右。用自来水配重