细菌培养及检测.ppt

目录
第一讲微生物细菌学
第二讲细菌培养
第三讲大肠杆菌
第四讲金黄色葡萄球菌
第五讲真菌学及其检测
第六讲微生物学及其检测
第一讲微生物细菌学
细菌的定义
细菌的形态
细菌的结构
细菌的生理
细菌的定义
细菌是一类具有细胞壁的单细胞原核型微生物。通常使用显微测微尺来测量细菌的大小,以微米(μm)作为测量单位
细菌的形态
:肺炎双球菌
:乳酸链球菌
:金黄色葡萄球菌
细菌的结构
基本结构:细胞壁、细胞膜、细胞浆、核质
特殊结构:荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢
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球菌形态
细菌的结构及功能
基本结构由外到内细菌的依次是
细胞壁、细胞膜、细胞浆
和核质
。
特殊结构有
荚膜、鞭毛、菌毛和芽孢。
其中能维持细菌的固有形态的结构是
细胞壁,
控制遗传性状的是
核质,
与细菌的毒力有关的结构是
荚膜和菌毛,
抵抗力强
的是
芽孢,
决定细菌有无运动性的结构是
鞭毛。
芽孢
菌体
细菌的生理
水分(70~90%):游离水和结合水
固形物(10~30%):有机物(蛋白质、核酸、糖类、脂类、其他)和无机物
细菌的化学组成
1、自养菌:自养菌具有完备的酶系统,合成能力较强,能以简单的无机碳化物作为碳源,合成菌体所需的有机物质。
2、异养菌:异养菌不具备完备的酶系统,合成能力较差,必须利用有机物作为碳源,其代谢所需能量大多从有机物氧化中获得。
致病菌多属异养菌,寄生菌多属自养菌。
细菌的营养类型
水、含碳化合物、含氮化合物、无无机盐
细菌的营养物质
1、细菌繁殖生长的条件:营养物质(五种营养成分)、温度(最适生长温度37℃)、pH(~)、渗透压(多在等渗条件下)、气体(根据细菌呼吸类型)
2、细菌的繁殖方式:简单的二分裂
细菌的生长繁殖
℃
第二讲细菌培养
根据某种细菌的营养需要而选择多种原料配制而成的培养基,不仅含有这种细菌生长繁殖所需要的各种营养物质,还要有适宜的PH。本实验所用的牛肉膏蛋白胨培养基,应用较广泛,适于芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌等多种细菌的培养。配置好的培养基必须经过灭菌。
对不同的材料应当采取不同的灭菌方法。培养基一般采用高压蒸汽灭菌法,就是将待灭菌的培养基放入密闭的高压灭菌锅内,通过加热是锅内的冷空气排进以后。关闭排气阀并继续加热,这是锅内的压力就会升高,最终使菌体蛋白质凝固变性,从而达到灭菌的目的。接种环是用火焰灼烧灭菌的。将某种菌种在彻底灭菌的培养基上,经过一段时间的培养后,就能够得到生长良好的细菌群体,它们在培养基上会呈现一定的形态特征。
1、通过对牛肉膏蛋白胨培养基的配置,了解配置培养基的一般步骤和方法。
2、了解灭菌的基本原理,以及实验中常用的灭菌方法。
3、初步学会细菌培养的基本技术。
一、细菌培养的实验原理
二、目的要求
大肠杆菌的生长状态
芽孢杆菌或金黄色葡萄球菌、牛肉膏、蛋白胨、琼脂。
天平、角匙、200mL烧杯、试管、漏斗、量筒、玻璃棒、滴管、胶管、弹簧夹、铁架台、酒精灯、石棉网、三脚架、火柴、纱布、棉花、牛皮纸、线绳、标签、接种环、精密pH试纸(或pH计)、金属小筐、高压蒸汽灭菌锅、恒温箱
NaCl、1mol/L的NaOH溶液、体积分数为75%的酒精溶液、蒸馏水。
三、材料用具
四、细菌培养的方法和步骤
(五)、培养
(四)、接种
(三)、搁置斜面
(二)、灭菌
(一)、培养基的配置
、1g蛋白胨、、2g琼脂。将称好的牛肉膏、蛋白胨和NaCl放入烧杯。
称量
向上述烧杯中加入蒸馏水100ml,用玻璃棒搅匀后,放到酒精灯上加热。当牛肉膏和蛋白胨溶化后,加入琼脂,并继续用微火加热,在琼脂溶化的过程中,要控制火力的大小,并且不断搅拌,以免培养基溢出或烧焦。待琼脂安全溶化后,补加蒸馏水至100ml。
溶化
用滴管逐滴滴入1mol/L的NaCl溶液,边滴边搅拌,并随时用pH试纸测pH,~。
调pH
将培养基趁热分类到洁净的试管中,培养基的高度约为试管高度的1/:分装时不要将培养基沾在管口和试管上段,以免引起污染。
分装
培养基分装完毕以后,在管口上加一个棉塞。棉塞能防止杂菌污染,保证通气良好。加棉塞时,应使棉塞长度的2/3哎试管口内。
加棉塞
(一)、培养基的配置
每10