HPLC原理与应用.pptx

、分配系数、离子交换作用或分子尺寸大小的差异,因此在同一推动力作用下,不同组分在固定相中的滞留时间有长有短,—流动相的选择流动相要求:(1)溶剂应当是高纯度,溶剂与固定相不互溶,并能保持色谱柱的稳定性;(2)溶剂的性能与使用的检测器应当匹配;选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长要长,甲醇:205nm;乙***:190nm(3)溶剂对样品应有足够的溶解能力;(4)溶剂应具有低的粘度和适当低的沸点;(5)尽量避免使用具有显著毒性的溶剂。常用流动相溶剂:反向色谱常用流动相及冲洗强度H2O<甲醇<乙***<丙醇<异丙醇<四氢呋喃最常用组成:甲醇/H2O、乙***/H2O洗脱顺序:极性物质先洗脱下来正想色谱常用流动相及冲洗强度正乙烷<***<乙酸乙酯<异丙醇洗脱方式—等度洗脱、梯度洗脱等度洗脱:整个洗脱过程中,流动相的组成比保持不变梯度洗脱:在一个分析周期中,按照一定的时间程序连续或阶段性的改变流动相的组成比,从而改变溶剂的极性、离子强度、pH值等,使每个组分在适宜的条件下获得分离。梯度洗脱优点:改善峰型;提高柱效;减少分析时间;使强滞留组分不容易残留在柱子。梯度洗脱装置二元高压梯度:先加压后混合利用两台高压输液泵,将两种不同极性的溶剂按一定的比例输入梯度混合室,混合后进入色谱柱。一台高压泵,通过比例调节阀,将两种或者多种不同极性的溶剂按一定比例抽入高压泵中混合四元低压梯度::多环芳烃、多***联苯、硝基化合物、酚类化合物、邻苯二甲酸脂等。:食品营养成分分析、食品添加剂分析、食品污染物分析。:合成药物:抗生素、抗忧郁药物、黄***类药等;天然药物:鉴别中药真伪或者产地、吲哚碱、鸦片碱、强心甙测定等。:有机农药、除草剂等。:无机化工产品、合成高分子化合物、表面活性剂、洗涤剂成分、化妆品、染料等。————苯及其衍生的分离谱图